江南大學周景文獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉江南大學申請的專利通過提升乙醇耐受性高產角鯊烯重組釀酒酵母工程菌株及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115786154B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211538674.8,技術領域涉及:C12N1/19;該發明授權通過提升乙醇耐受性高產角鯊烯重組釀酒酵母工程菌株及應用是由周景文;曾偉主;張云亮;劉松;陳堅;余世琴設計研發完成,并于2022-12-01向國家知識產權局提交的專利申請。
本通過提升乙醇耐受性高產角鯊烯重組釀酒酵母工程菌株及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了通過提升乙醇耐受性高產角鯊烯重組釀酒酵母工程菌株及應用,屬于基因工程和生物工程技術領域。本發明擴大MVA途徑的代謝流,解除路徑的代謝阻礙,使整個代謝路徑暢通,保證充足的乙酰輔酶A最大極限的用于產物積累。通過海藻糖合成及熱激蛋白的調節,增強了脅迫環境下的菌株耐受力,使得工程菌株在高濃度乙醇下依舊具有優良的代謝及生長生產能力。改造后的釀酒酵母菌株活性提高了80.21%,乙醇耐受能力提高到了30gL,并且在50gL乙醇脅迫下依舊具備優良活性。通過代謝工程改造與脅迫環境耐受能力的改造相結合,釀酒酵母發酵角鯊烯產量達到27.33gL,細胞生產干重650.13mggDCW。
本發明授權通過提升乙醇耐受性高產角鯊烯重組釀酒酵母工程菌株及應用在權利要求書中公布了:1.一種高產角鯊烯的基因工程菌,其特征在于,以釀酒酵母C800為出發菌株,敲除基因組上轉錄因子YPL062W、ROX1、YJL064W、DOS2以及DPP1,整合表達基因tHMG1、IDI1、ERG19、ERG20、ERG10、ERG13、ERG12、ERG8、ERG9、ADH2、ALD6、ACS、HSP104、TPS1,并回補基因URA;其中,在Ty1和Ty4位點多拷貝整合基因tHMG1和IDI1,敲除YPL062W位點后,在YPL062W位點整合基因ERG19和ERG20;敲除ROX1位點后,在ROX1位點整合基因ERG10、ERG13、ERG12、ERG8、ERG9;敲除YPL062W位點后,在YPL064W位點整合基因ADH2、ALD6、ACS,敲除DPP1位點后,在DPP1位點整合基因HSP104和TPS1;所述基因tHMG1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述基因IDI1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述基因YPL062W的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示,所述基因ROX1的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示,所述基因YJL064W的核苷酸序列如SEQIDNO.18所示,所述基因DOS2的核苷酸序列如SEQIDNO.23所示,所述基因DPP1的核苷酸序列如SEQIDNO.24所示;ERG20的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示,ERG19的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示,ERG9的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示,ERG10的核苷酸序列如SEQIDNO.12所示,ERG13的核苷酸序列如SEQIDNO.13所示,ERG12的核苷酸序列如SEQIDNO.14所示,ERG8的核苷酸序列如SEQIDNO.16所示,所述基因ADH2的核苷酸序列如SEQIDNO.20所示,所述基因ALD6的核苷酸序列如SEQIDNO.21所示,所述基因ACS的核苷酸序列如SEQIDNO.22所示,所述基因HSP104的核苷酸序列如SEQIDNO.25所示,所述基因TPS1的核苷酸序列如SEQIDNO.26所示,所述基因URA的核苷酸序列如SEQIDNO.27所示。
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