買專利賣專利找龍圖騰，真高效！ 查專利查商標用IPTOP,全免費！專利年費監控用IP管家,真方便！

龍圖騰網獲悉中國科學院城市環境研究所申請的專利一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法及其應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119715077B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202411933445.5，技術領域涉及：G01N1/30；該發明授權一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法及其應用是由楊軍;厲舒禎;薛媛媛;陳輝煌設計研發完成，并于2024-12-26向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法及其應用在說明書摘要公布了：本發明公開了一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法及其應用，涉及生物學、生態學和環境科學技術領域。本發明包括如下步驟：S1、確定采樣位點；S2、水樣采集；S3、樣本過濾；S4、PMA處理；S5、樣本存放。本發明將PMA染色處理用于真核浮游生物樣本采集過程中，可得到環境中活體真核浮游生物信息，能夠檢測和區分總體與活體真核浮游生物種類和數量，提高檢測效率，從而對水體不同水層中不同粒徑浮游生物群落的多樣性進行快速準確的量化。

本發明授權一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法及其應用在權利要求書中公布了：1.一種基于環境DNA技術檢測湖庫活體真核浮游生物的方法，其特征在于，包括如下步驟： S1、確定采樣位點： S1-1：根據水溫在湖庫水體垂直剖面上的變化速率，將水體分為湖上層、溫躍層和湖下層； S1-2：若水體深度小于3m或不存在熱分層時，采集表層0.5m處水體樣本； S1-3：若水深為3-10m時，分別采集表層0.5m處水體和底層沉積物上方1-2m處水體樣本； S1-4：若水深大于10m時，采集3-5個水層的樣本，包括湖上層0.5m處水體、溫躍層水層、湖下層的沉積物上方1-2m處水體樣本，以及湖上層和湖下層的中間位置； S2、水樣采集：明確采樣位點后，進行各水層的水樣采集，每個樣點至少采集10L水樣； S3、樣本過濾： S3-1：使用200μm尼龍篩絹預過濾去除水體中大顆粒物質和大型浮游生物，使用孔徑為3μm的聚碳酸酯濾膜過濾，完成過濾后取下濾膜并用鋁箔紙包裹，放入滅菌后的2mL離心管保存，將這一步產生的過濾后水樣進行收集； S3-2：使用孔徑為0.22μm的聚碳酸酯濾膜過濾，完成過濾后取下濾膜并用鋁箔紙包裹，放入滅菌后的2mL離心管保存； S3-3：每份樣品過濾收集3-6份重復樣本； S4、PMA處理：將收集的濾膜分為兩部分，一部分濾膜采用PMA染色處理，將濾膜放入直徑為5cm的培養皿中，均勻浸入500μL終濃度為50μgmL的PMA染料中黑暗處理20min，隨后暴露于距離培養皿20cm處200W的LED燈下照射15min；另一部分未經PMA處理的濾膜也與經PMA處理的濾膜一起光照，最終得到非PMA和PMA的樣品，非PMA即總DNA，PMA即活體生物DNA； S5、樣本存放：光照結束后，將所有濾膜保存在-80℃超低溫冰箱，用于后續DNA提取、PCR擴增和DNA測序。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人中國科學院城市環境研究所，其通訊地址為：361021 福建省廈門市集美區集美大道1799號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。