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龍圖騰網獲悉華南理工大學申請的專利一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和/或選擇性增強的突變體及其篩選方法與應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN120442755B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510947389.9，技術領域涉及：C12Q1/48；該發明授權一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和/或選擇性增強的突變體及其篩選方法與應用是由婁文勇;李梅;曹宇飛;李廣健;謝薇設計研發完成，并于2025-07-10向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和/或選擇性增強的突變體及其篩選方法與應用在說明書摘要公布了：本發明公開一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和或選擇性增強的突變體及其篩選方法與應用。本發明構建以p?香豆酸為底物合成根皮素的重組質粒，通過結構預測和催化機制，篩選出與EbCHS催化活性和選擇性相關的位點，再實驗篩選得到有效突變體和有效突變位點；將EbCHS與不同CHS序列比對，篩選實驗，得到與前述有效突變位點鄰近的非保守氨基酸位點的有效突變體；將得到的兩種有效突變體進行兩兩組合，得到相關檢測信息；依據前述實驗信息建庫以及機器學習建模預測，實驗驗證，獲得在根皮素合成途徑中活性和選擇性顯著增強的EbCHS，能以p?香豆酸為底物高效合成根皮素，且降低副產物，為促進根皮素的工業化生產提供了技術支持。

本發明授權一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和/或選擇性增強的突變體及其篩選方法與應用在權利要求書中公布了：1.一種燈盞細辛查爾酮合酶活性和選擇性增強的突變體的篩選方法，其特征在于包括如下步驟： （1）將Pc4CL編碼基因、ScTSC13編碼基因和EbCHS編碼基因構建于同一個載體骨架上，得到重組質粒； （2）通過對EbCHS三維結構的預測，根據CHS催化機制，初步篩選出與EbCHS催化活性和選擇性相關的位點； （3）對步驟（2）篩選出的位點構建單個位點飽和突變的質粒，再轉化入釀酒酵母底盤細胞中，在尿嘧啶缺陷型瓊脂板培養，得到重組菌株；接著在含p-香豆酸的發酵培養基中培養重組菌株，測定發酵液中的根皮素和副產物，篩選得到與EbCHS催化活性和選擇性相關的有效突變體，得到有效突變位點；所述的有效突變體為EbCHSF168Y、EbCHSP84S、EbCHST200C、EbCHSS341A、EbCHSS211G； （4）將EbCHS與不同植物來源的CHS序列比對，篩選步驟（3）得到的有效突變位點鄰近的非保守氨基酸位點；所述的非保守氨基酸位點為N83、S85、A169、G171、V199、L212和C344； （5）對步驟（4）篩選出的位點構建單個位點飽和突變的質粒，再轉化入釀酒酵母底盤細胞中，在尿嘧啶缺陷型瓊脂板培養，得到重組菌株；在含p-香豆酸的發酵培養基中培養重組菌株，測定發酵液中的根皮素和副產物，篩選得到非保守氨基酸有效突變體；所述的非保守氨基酸有效突變體為EbCHSC344S； （6）依據步驟（3）得到的有效突變體和步驟（5）得到的非保守氨基酸有效突變體信息，設計每個EbCHS突變體中含有兩個位點突變組合的序列；接著構建含有兩個位點突變的質粒，再轉化入釀酒酵母底盤細胞中，在尿嘧啶缺陷型瓊脂板培養，得到重組菌株；接著在含p-香豆酸的發酵培養基中培養重組菌株，測定發酵液中的根皮素和副產物，得到相關信息； （7）將步驟（3）得到的有效突變位點和步驟（4）得到的非保守氨基酸位點分別進行單個位點飽和突變，與步驟（6）得到的兩個突變組合，得到突變序列庫； （8）依據步驟（3）、步驟（5）、步驟（6）的檢測結果，對步驟（7）得到的突變序列庫進行機器學習和預測，再依據EbCHS活性預測的突變序列構建得到含有突變的質粒，轉入釀酒酵母底盤細胞中，在尿嘧啶缺陷型瓊脂板培養，得到重組菌株；在含p-香豆酸的發酵培養基中培養重組菌株，測定發酵液中的根皮素和副產物，篩選得到燈盞細辛查爾酮合酶活性和選擇性增強的突變體，為EbCHSF168Y,S211G,C344A、EbCHSF168Y,S211G,C344S或EbCHSF168Y ,V199I,S211G,C344A； 步驟（1）中所述的Pc4CL編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示； 步驟（1）中所述的ScTSC13編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示； 步驟（1）中所述的EbCHS編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示； 步驟（2）中所述的CHS催化機制為MsCHS的催化機制； 步驟（3）、步驟（5）、步驟（6）和步驟（8）中所述的副產物為柚皮素和2H-BNY。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人華南理工大學，其通訊地址為：510640 廣東省廣州市天河區五山路381號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。