陜西省中醫藥研究院;陜西省中醫醫院張紅獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉陜西省中醫藥研究院;陜西省中醫醫院申請的專利一種清瘟護肺顆粒的超高效液相色譜-質譜檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115950972B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211478410.8,技術領域涉及:G01N30/02;該發明授權一種清瘟護肺顆粒的超高效液相色譜-質譜檢測方法是由張紅;龍凱花;杜霞;李曄;劉靜;曹利平設計研發完成,并于2022-11-23向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種清瘟護肺顆粒的超高效液相色譜-質譜檢測方法在說明書摘要公布了:本發明提供一種清瘟護肺顆粒的超高效液相?質譜檢測方法,本發明采用超高效液相色譜?四級桿靜電場軌道阱高分辨質譜法UHPLC?QExactiveFocusMSMS技術,經對照品比對確認,本發明檢測方法共鑒定出清瘟護肺顆粒中解析出的萜類化合物有17個包括斷氧化馬錢子苷、斷馬錢子酸等成分、苯丙素類化合物有28個1?O?咖啡酰奎寧酸、綠原酸、5?對香豆酰奎寧酸、3?O?咖啡酰奎寧酸甲酯、羅漢松脂素、1,3?O?二咖啡酰奎寧酸等成分、色原酮類8個亥茅酚、總黃酮類29個包括金絲桃苷和蘆丁等成分、有機酸類化合物有18個咖啡酸等成分、苷類化合物有36個、其他類化合物有23個,本發明檢測方法對清瘟護肺顆粒中的中藥化學成分進行快速在線分離與鑒定,為其藥效物質基礎、質量控制及作用機制研究提供科學依據。
本發明授權一種清瘟護肺顆粒的超高效液相色譜-質譜檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種清瘟護肺顆粒的超高效液相色譜-質譜檢測方法,其特征在于,所述檢測方法包括以下步驟: ⑴、色譜條件:C18色譜柱,柱溫30~40℃,流速設定0.1~0.5mL·min-1,流動相:甲醇A-0.1%甲酸水溶液B,0~3min,1%A;3~20min,1%~35%A;20~33min,35%~80%A;33~35min,80%A;35~44min,80%~98%A;44~46min,98%A; ⑵、質譜條件為:離子源為加熱電噴霧離子源HESI,采用正、負離子監測模式,以正離子模式噴霧電壓為3~4kV,負離子模式噴霧電壓為2~4kV,鞘氣體積流量正、負離子模式均為30~50個流量單位,輔助氣流量正、負離子模式均為8~12個流量單位,毛細管溫度正、負離子模式均為310~330℃,霧化溫度330~370℃,最大噴射電流正、負離子模式均為80~120A,S-lensRFlevel為40~60,掃描模式FullMSdd-MS2,FullMS分辨率6~8萬,離子源為HESI,dd-MS2分辨率16000~18000,掃描范圍mz60~1500;碰撞能量CE設定20~40eV; ⑶、樣品溶液的制備:取清瘟護肺顆粒,精密稱定,加60%~80%甲醇,超聲時間20~40min,放至室溫,用60%~80%甲醇補足失重,濾過,取續濾液即得; ⑷、對照品溶液的制備:稱取對照品,加甲醇溶解并定容,制備綠原酸、甘草苷、濱蒿內酯、5-O-甲基維斯阿米醇苷、哈巴苷、連翹酯苷A、木犀草苷、4,5-O-二咖啡酰奎寧酸、連翹苷、哈巴俄苷、升麻素苷質量濃度分別為0.1~0.15mg·mL-1、0.6~1.0mg·mL-1、0.08~0.13mg·mL-1、0.10~0.16mg·mL-1、0.13~0.17mg·mL-1、0.12~0.16mg·mL-1、0.14~0.18mg·mL-1、0.16~0.21mg·mL-1、0.13~0.17mg·mL-1、0.17~0.21mg·mL-1、0.19~0.23mg·mL-1的對照品儲備液; ⑸、文獻庫的建立:查閱CNKI、PubMed、WebofScience數據庫,檢索清瘟護肺顆粒組方藥材金銀花、連翹、浙貝母、大青葉、淡竹葉、桔梗、黨參、炒白術、茯苓、玄參、麥冬、苦杏仁、茵陳、防風、紫蘇葉和甘草的化學成分研究文獻,結合文獻報道和ChemicalBook數據庫信息,匯總所含化學成分的中文名稱、英文名稱、類別、參考文獻及結構鑒定信息,包括分子式、相對分子質量、mol格式的結構式、一級、多級質譜信息,建立清瘟護肺顆粒全藥材化學成分庫; 6、化合物鑒定:根據液質檢測結果,采用Xcalibur4.0軟件擬合分子式,得到一級信息匹配的數據庫,與自建的清瘟護肺顆粒全藥材化學成分庫進行重復性篩選,對篩選庫根據二級分子信息推斷裂解的碎片信息,無法匹配的碎片離子根據ChemSpider數據庫中下載的.mol格式的結構式在賽默飛裂解軟件中進行裂解及碎片離子分析,根據對照品、數據庫、參考文獻、賽默飛裂解軟件提供的碎片離子信息進一步推測化合物的裂解規律。
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