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龍圖騰網獲悉華中科技大學;海南大學三亞研究院申請的專利一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN116004545B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202211673577.X，技術領域涉及：C12N5/10；該發明授權一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法是由祁淑紅;張杰;張智紅設計研發完成，并于2022-12-26向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法在說明書摘要公布了：本發明提供了一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法，所述方法包括：構建雙色熒光蛋白標記細胞焦亡效應基因GSDME和組蛋白基因H2B的PB載體質粒；篩選穩定表達雙色熒光蛋白標記的GSDME和H2B的B16腫瘤細胞焦亡細胞株；使用Caspase?3活化的藥物刺激雙色熒光蛋白標記的GSDME和H2B的B16腫瘤細胞焦亡細胞株，通過熒光顯微成像可視化B16腫瘤細胞焦亡過程以及細胞活性檢測。本發明一方面能夠直觀可視化觀察腫瘤細胞焦亡發生時細胞核以及細胞形態學的變化；另一方面本發明建立的B16腫瘤細胞焦亡細胞株模型可作為篩選誘導細胞焦亡藥物的有力工具，為進一步探究可視化細胞焦亡激起的免疫學分子機制提供手段。

本發明授權一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法在權利要求書中公布了：1.一種基于雙色熒光標記的腫瘤細胞焦亡模型的構建方法，其特征在于，所述方法包括： 構建雙色熒光蛋白標記細胞焦亡效應基因GSDME和組蛋白基因H2B的PB載體質粒，所述雙色熒光蛋白為mCerulean和mCherry；包括：使用限制性內切酶切開PB載體，使PB載體線性化；用mCerulean標記GSDME片段，獲得GSDME-mCerulean片段；使用mCherry標記H2B片段，獲得H2B-mCherry片段；將所述GSDME-mCerulean片段和所述H2B-mCherry片段構建到PB載體上，獲取雙色熒光蛋白標記GSDME-mCerulean和H2B-mcherry的PB載體質粒，所述GSDME-mCerulean片段和所述H2B-mCherry片段通過IRES-linker連接起來，以使兩個熒光蛋白標記的分子能夠獨立表達；所述IRES的堿基序列為：CTCGAGTACTCCGGTATTGCGGTACCCTTGTACGCCTGTTTTATACTCCCTTCCCGTAACTTAGACGCACAAAACCAAGTTCAATAGAAGGGGGTACAAACCAGTACCACCACGAACAAGCACTTCTGTTTCCCCGGTGATGTCGTATAGACTGCTTGCGTGGTTGAAAGCGACGGATCCGTTATCCGCTTATGTACTTCGAGAAGCCCAGTACCACCTCGGAATCTTCGATGCGTTGCGCTCAGCACTCAACCCCAGAGTGTAGCTTAGGCTGATGAGTCTGGACATCCCTCACCGGTGACGGTGGTCCAGGCTGCGTTGGCGGCCTACCTATGGCTAACGCCATGGGACGCTAGTTGTGAACAAGGTGTGAAGAGCCTATTGAGCTACATAAGAATCCTCCGGCCCCTGAATGCGGCTAATCCCAACCTCGGAGCAGGTGGTCACAAACCAGTGATTGGCCTGTCGTAACGCGCAAGTCCGTGGCGGAACCGACTACTTTGGGTGTCCGTGTTTCCTTTTATTTTATTGTGGCTGCTTATGGTGACAATCACAGATTGTTATCATAAAGCGAATTGGATAGGATCCGTACGATGGTGGTAGGGATCCG； 篩選穩定表達雙色熒光蛋白標記的GSDME和H2B的B16腫瘤細胞焦亡細胞株； 使用Caspase-3活化的藥物刺激雙色熒光蛋白標記的GSDME和H2B的B16腫瘤細胞焦亡細胞株，通過熒光顯微成像可視化B16腫瘤細胞焦亡過程以及細胞活性檢測。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人華中科技大學;海南大學三亞研究院，其通訊地址為：430070 湖北省武漢市洪山區珞喻路1037號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。