濟南磐升生物技術有限公司張甜甜獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉濟南磐升生物技術有限公司申請的專利一種含基底膜的人工皮膚及制備方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116870259B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202310858924.4,技術領域涉及:C12N5/071;該發明授權一種含基底膜的人工皮膚及制備方法是由張甜甜;王敏;邢志青;張平;藺易;單風娟;孫紅;王鑫玉;王杰;王紅麗設計研發完成,并于2023-07-13向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種含基底膜的人工皮膚及制備方法在說明書摘要公布了:本發明提供了一種含基底膜的人工皮膚及制備方法,該方法以真皮成纖維細胞、角質形成細胞以及基底膜的結構組成成分制備含基底膜的人工皮膚。該方法中,在真皮成纖維細胞中添加了基底膜的結構組成成分、細胞外基質成分和維持細胞生長需要的成分,這些成分可以促進真皮成纖維細胞的生長、增殖,或可以作為真皮成纖維細胞的支架材料,或可以增強細胞間粘連及細胞與基質的粘連,或可刺激、促進真皮細胞或者表皮細胞分泌一些細胞外基質成分,在真皮層和表皮層之間形成基底膜,使真皮層和表皮層之間的連接更加緊密。該人工皮膚包含表皮層、基底膜和真皮層,含有活細胞,與正常皮膚結構相似,可用于多種創傷造成的皮膚創面的治療、皮膚模型的制備。
本發明授權一種含基底膜的人工皮膚及制備方法在權利要求書中公布了:1.一種含基底膜的人工皮膚的制備方法,其特征在于,包括: 在支撐膜上加入明膠或膠原蛋白,得到包被支撐膜; 在所述包被支撐膜上加入真皮成纖維細胞,所述真皮成纖維細胞經過多次重復試劑A重懸、離心、PBS清洗、再離心后,得到包被真皮成纖維細胞; 試劑B、試劑C、試劑D和試劑E混合為混合溶液,將所述包被真皮成纖維細胞加入到調節pH值至中性后的所述混合溶液中,混均后在室溫或37℃下孵育培養,得到真皮細胞混合物; 所述真皮細胞混合物在溫度為37℃、5%CO2條件下培養,得到真皮層; 向所述真皮層上加入試劑F,孵育形成試劑F真皮層; 將角質形成細胞接種到所述試劑F真皮層上,在人工皮膚表皮培養基中培養; 培養結束后,更換角化介質培養基浸沒培養1-5天后,再次更換角化介質培養基進行氣液面培養,形成含基底膜的人工皮膚; 其中,所述試劑A包括:含纖連蛋白和明膠的緩沖液或培養基; 所述試劑B包括:DMEM、MEM和F12培養基中的至少一種; 所述試劑C包括:L-谷氨酰胺溶液; 所述試劑D包括:血清; 所述試劑E包括:膠原蛋白、絲素蛋白、透明質酸、明膠和殼聚糖中的至少一種; 所述試劑F包括:IV型膠原蛋白、巢蛋白和硫酸類肝素蛋白多糖中的至少一種; 所述纖連蛋白在緩沖液或培養基中的濃度為0.01-0.1mgmL,所述L-谷氨酰胺溶液的濃度為200mM 所述真皮成纖維細胞用量為105-6×107細胞cm2。
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