山西農(nóng)業(yè)大學(xué)杜涓麗獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉山西農(nóng)業(yè)大學(xué)申請的專利一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN119595618B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-26發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202411653606.5,技術(shù)領(lǐng)域涉及:G01N21/78;該發(fā)明授權(quán)一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法是由杜涓麗;張建海;荊旭;王曉聞;吳昊;馮爽;張雅雯;馬建功設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2024-11-19向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法,使用天然低共熔溶劑代替有毒有機(jī)溶劑作為萃取劑,減少了對環(huán)境和人體的傷害,提高了萃取效率,同時(shí)有利于保護(hù)酶的活性,使得檢測更靈敏和穩(wěn)定;采用簡單快速的攪拌法合成的磁性COFTpPa?Cl@Fe3O4,不僅具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性可多次重復(fù)使用,而且具有優(yōu)異的吸附能力和強(qiáng)磁性,將其用作改良QuEChERS的吸附劑,少量即可有效去除樣品中的干擾物質(zhì),縮短了預(yù)處理時(shí)間,簡化了凈化過程;在酶抑制比色檢測過程中,結(jié)合智能手機(jī)的數(shù)字圖像比色法進(jìn)行定量分析。整體具有綠色、高效、耗時(shí)短、成本低、操作簡單、靈敏度高等顯著優(yōu)勢。
本發(fā)明授權(quán)一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法在權(quán)利要求書中公布了:1.一種改良QuEChERS結(jié)合酶抑制比色法快速檢測肉類中磺胺類藥物的方法,針對的待檢測磺胺類藥物包括磺胺嘧啶、磺胺、磺胺噻唑、磺胺甲噁嗪和磺胺二甲氧嘧啶中的一種或幾種,其特征在于,包括如下步驟: S1,以丙二醇為氫鍵供體,以甜菜堿為氫鍵受體,氫鍵供體和氫鍵受體混合比例按摩爾比1:1~1:6,水浴加熱形成澄清透明液體,水浴溫度為80℃,得到丙二醇-甜菜堿作為萃取劑,丙二醇-甜菜堿的含水量為0%; S2,在肉類樣品中添加步驟S1制備好的丙二醇-甜菜堿,肉類樣品和丙二醇-甜菜堿按照0.5~3g:200-800μL進(jìn)行混合,渦旋混勻后離心,渦旋時(shí)間為0.5~2min,離心時(shí)間為90s,轉(zhuǎn)速為5000rmin,抽取液體得到萃取液a; S3,在步驟S2中獲得的萃取液a中加入吸附劑,吸附劑為COFTpPa-Cl@Fe3O4,萃取液a與COFTpPa-Cl@Fe3O4按照1mL:10mg的比例進(jìn)行混合,渦旋后通過外加磁場吸附去除雜質(zhì)后得到萃取液b; S4,將步驟S3中獲得的萃取液b與新鮮制備的碳酸酐酶溶液、磷酸鹽緩沖液、對硝基苯乙酸酯溶液置于容器中混合,對混合物進(jìn)行孵育后,將容器置于不透明的白色盒子中,白色盒子的頂部采用LED燈板均勻照明,用智能手機(jī)捕捉容器中混合物的顏色變化,然后使用AdobePhotoshopCC軟件讀取活動(dòng)部位在RGB模式下的紅、綠、藍(lán)三個(gè)通道的通道值,并計(jì)算肉類樣品中待檢測磺胺類藥物的強(qiáng)度; S5,制備不同磺胺類藥物的標(biāo)準(zhǔn)品,與新鮮制備的碳酸酐酶溶液、磷酸鹽緩沖液、對硝基苯乙酸酯溶液置于容器中混合,對混合物進(jìn)行孵育后,將容器置于不透明的白色盒子中,白色盒子的頂部采用LED燈板均勻照明,用智能手機(jī)捕捉容器中混合物的顏色變化,然后使用AdobePhotoshopCC軟件讀取活動(dòng)部位在RGB模式下的紅、綠、藍(lán)三個(gè)通道的通道值,并計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品的強(qiáng)度,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、相應(yīng)的強(qiáng)度為縱坐標(biāo),繪制不同磺胺類藥物的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,將步驟S4中獲得的肉類樣品中待檢測磺胺類藥物的強(qiáng)度代入標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,得到肉類樣品中磺胺類藥物的濃度。
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