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龍圖騰網獲悉北京航空航天大學杭州創新研究院;杭州樂為生醫科技有限公司申請的專利一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN120249442B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-26發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510738094.0，技術領域涉及：C12Q1/6804；該發明授權一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法是由高陽;韓改凈設計研發完成，并于2025-06-04向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法在說明書摘要公布了：本發明公開了醫學檢測技術領域的一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法，包括步驟一、免疫結合；步驟二、酶切釋放，釋放發卡環DNA單鏈；步驟三、互補和酶連，添加T4連接酶將環狀DNA單鏈環化；步驟四、滾環擴增；步驟六、檢測，通過qPCR和原位寡核苷酸熒光標記檢測方法定量和定位。本發明通過抗體上偶聯的寡核苷酸DNA鏈上的發卡環結構保護互補序列避免產生非特異性環狀DNA單鏈，并結合滾環擴增技術放大檢測信號，抑制檢測背景信號強度的同時增強檢測信號的特異性，進一步提高檢測的靈敏度。

本發明授權一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法在權利要求書中公布了：1.一種基于鄰近核酸擴增信號放大的超靈敏免疫檢測方法，其特征在于：包括以下步驟： 步驟一、免疫結合，在樣本中加入第一DNA抗體偶聯探針（1）和第二DNA抗體偶聯探針（2）結合抗原形成三明治免疫復合物； 步驟二、酶切釋放，使用分枝結構內切酶切斷第一DNA抗體偶聯探針（1）和第二DNA抗體偶聯探針（2）DNA發卡結構的5'端分枝處，釋放與另一個偶聯探針的寡核苷酸DNA鏈根部（4）互補的發卡環（6）DNA單鏈； 步驟三、互補和酶連，在抗體免疫結合形成的鄰近作用影響下，第一DNA抗體偶聯探針（1）和第二DNA抗體偶聯探針（2）被切開的寡核苷酸DNA鏈相互互補，形成與兩個偶聯探針的寡核苷酸DNA鏈同時互補的具有兩個缺口的環狀DNA單鏈，且缺口處的單鏈末端相鄰，添加T4連接酶將環狀DNA單鏈環化； 步驟四、滾環擴增，添加phi29聚合酶進行環狀DNA單鏈的滾環擴增； 步驟五、檢測，通過qPCR檢測滾環擴增產物上重復的特異性序列分析抗體（3）的含量，通過原位寡核苷酸熒光標記檢測方法檢測滾環擴增產物上重復的特異性序列在組織細胞中進行原位熒光成像； 其中，所述第二DNA抗體偶聯探針（2）上偶聯有DNA單鏈，DNA單鏈為發卡環（6）結構，且為3'端-5'端序列； 所述第一DNA抗體偶聯探針（1）上偶聯有部分雙鏈DNA，其中一條DNA單鏈為發卡環（6）結構，且為3'端-5'端序列； 所述第一DNA抗體偶聯探針（1）偶聯的部分雙鏈DNA中的發卡環（6）結構序列與第二DNA抗體偶聯探針（2）偶聯的DNA單鏈根部（4）序列反向互補，第二DNA抗體偶聯探針（2）偶聯的DNA單鏈發卡環（6）結構序列與第一DNA抗體偶聯探針（1）偶聯的部分雙鏈DNA中暴露單鏈序列反向互補； 所述第一DNA抗體偶聯探針（1）偶聯的部分雙鏈DNA中的發卡環（6）結構序列和第二DNA抗體偶聯探針（2）偶聯的DNA單鏈中的發卡環（6）結構序列長度均為8-15bp。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人北京航空航天大學杭州創新研究院;杭州樂為生醫科技有限公司，其通訊地址為：310056 浙江省杭州市濱江區長河街道炬航弄99號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。