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龍圖騰網獲悉山東第一醫科大學(山東省醫學科學院)申請的專利一種3D軟骨組織及其制備方法和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN120366202B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510878598.2，技術領域涉及：C12N5/077；該發明授權一種3D軟骨組織及其制備方法和應用是由韓金祥;崔亞洲;王京;欒靜設計研發完成，并于2025-06-27向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種3D軟骨組織及其制備方法和應用在說明書摘要公布了：本發明屬于組織工程與再生醫學領域，具體涉及一種3D軟骨組織及其制備方法和應用。針對現有技術中間充質干細胞來源受限、誘導軟骨易纖維化等問題，本發明通過轉錄因子轉染結合多階段小分子調控，將皮膚成纖維細胞重編程為軟骨前體細胞，并利用動態3D培養系統優化軟骨顆粒的形成與功能維持。實驗證實，該方法誘導的軟骨組織標志基因表達正常，COL10陰性，阿利新藍染色與免疫組化驗證其透明軟骨特性，且體內修復實驗顯示顯著療效。本方案原料易得、成本可控，為軟骨缺損修復及類器官研究提供了高效、穩定的技術平臺。

本發明授權一種3D軟骨組織及其制備方法和應用在權利要求書中公布了：1.一種3D軟骨組織的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 將皮膚成纖維細胞進行消化，得到細胞沉淀； 將含有或能夠激活OCT4、SOX2和KIF4的質粒轉染至所述細胞沉淀，得到電轉后的細胞懸液； 采用培養基B對電轉后的細胞懸液進行培養，得到高致密度細胞； 分離出所述高致密度細胞中的高核質比細胞，進行培養傳代，得到傳代細胞； 采用培養基C對所述傳代細胞進行培養，結束后轉入3D培養容器，加入培養基D進行培養； 更換為培養基E，繼續3D培養； 補充培養基D，培養得到3D軟骨組織； 所述培養基B用于調控細胞基因表達和信號通路，助力細胞重編程以獲得向軟骨細胞分化的潛能； 所述培養基C用于引導已重編程的細胞向軟骨細胞方向分化，使其逐漸具備軟骨細胞特性； 所述培養基D用于促進細胞在3D環境下向軟骨組織分化并形成軟骨組織； 所述培養基E用于支持軟骨組織的成熟和維持； 所述培養基B由以下組分組成：基礎培養基DMEMF12，Insulin、抗壞血酸二磷酸、轉鐵蛋白、硒鹽、TGF-β3、FGF2、Chir99021、PD0325901、A-83-01、pH調節劑、LDN-193189、FSK、VPA、BMP4、DZNeP、EPZ5676、RepSox、AM580和Brdu； 所述Insulin的終濃度為18~22μgmL； 所述抗壞血酸二磷酸的終濃度為180~220μgmL； 所述轉鐵蛋白的終濃度為18~22μgmL； 所述硒鹽的終濃度為18~22ngmL； 所述TGF-β3的終濃度為1.8~2.2ngmL； 所述FGF2的終濃度為36~44ngmL； 所述Chir99021的終濃度為45~55nM； 所述PD0325901的終濃度為9~11nM； 所述A-83-01的終濃度為4.5~5.5nM； 所述LDN-193189的終濃度為4.5~5.5nM； 所述FSK的終濃度為9~11μM； 所述VPA的終濃度為0.09~0.11mM； 所述BMP4的終濃度為9~11ngmL； 所述DZNeP的終濃度為0.045~0.055μM； 所述EPZ5676的終濃度為4.5~5.5μM； 所述RepSox的終濃度為4.5~5.5μM； 所述AM580的終濃度為0.045~0.055μM； 所述Brdu的終濃度為9~11μM； 所述培養基C由以下組分組成：基礎培養基DMEMKO，FBS、KSR、BMP4、Chir99021、FGF2、Wnt3A和GluMax； 所述FBS的終體積百分濃度為0.83~1.67%； 所述KSR的終體積百分濃度為1.67~3.33%； 所述BMP4的終濃度為10~20ngmL； 所述Chir99021的終濃度為10~30nM； 所述FGF2的終濃度為5~20ngmL； 所述Wnt3A的終濃度為5~20ngmL； 所述GluMax的終體積百分濃度為0.5~2%； 所述培養基D由以下組分組成：基礎培養基DMEM，KSR、GluMax、TGFβ-3、BMP-4、地塞米松、抗壞血酸、脯氨酸和iTS-plus； 所述KSR的終體積百分濃度為3~5%； 所述GluMax的終體積百分濃度為0.5~1.5%； 所述TGFβ-3的終濃度為5~10ngmL； 所述BMP-4的終濃度為10~20ngmL； 所述地塞米松的終濃度為80~120nM； 所述抗壞血酸的終濃度為30~80μgmL； 所述脯氨酸的終濃度為20~60μgmL； 所述iTS-plus的終體積百分濃度為0.8~1.2%； 所述培養基E由以下組分組成：基礎培養基DMEM，KSR、GluMax、NEAA、丙酮酸、地塞米松、GDF5、FGF2、iTS-plus、抗壞血酸和脯氨酸； 所述KSR的終體積百分濃度為3~5%； 所述GluMax的終體積百分濃度為0.5~1.5%； 所述NEAA的終體積百分濃度為0.5~1.5%； 所述丙酮酸的終體積百分濃度為0.5~1.5%； 所述地塞米松的終濃度為80~120nM； 所述GDF5的終濃度為100ngmL； 所述FGF2的終濃度為1~5ngmL； 所述iTS-plus的終體積百分濃度為0.5~1.5%； 所述抗壞血酸的終濃度為30~80μgmL； 所述脯氨酸的終濃度為20~60μgmL。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人山東第一醫科大學(山東省醫學科學院)，其通訊地址為：250000 山東省濟南市槐蔭區青島路6699號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。