湘潭大學蔡昌群獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉湘潭大學申請的專利一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器的制備方法及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115524480B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210526724.4,技術領域涉及:G01N33/533;該發明授權一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器的制備方法及應用是由蔡昌群;蔡甘萍;陳思宇;陳小明設計研發完成,并于2022-05-16向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器的制備方法及應用在說明書摘要公布了:本發明提供了一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡?適體傳感器的制備方法及應用。本發明中所提出的病毒分子印跡?適體傳感器由磁性分子印跡聚合物和適體功能化的持久發光納米粒子Zn2GeO4:Mn2+?H5N1適體ZGO?H5N1Apt組成?;谒麄儗5N1病毒的同時識別,產生強烈的持續發光信號變化。利用持久發光納米材料獨特的發光特性和印跡聚合物和適體的高選擇性,所構建的傳感器有效消除了血清樣品中自發熒光物質的背景干擾,實現了H5N1病毒的高靈敏、高選擇性檢測,病毒分子印跡傳感器的設計和在復雜生物樣品中的實際應用提供了新的途徑。
本發明授權一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器的制備方法及應用在權利要求書中公布了:1.一種基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器的制備方法,其特征在于:以磁性Fe3O4納米粒子為印跡載體進行印跡,洗脫后得到具有H5N1印跡空腔的磁性印跡聚合物,同時合成持久發光納米材料Zn2GeO4:Mn2+ZGO并對其進行H5N1適體功能化,最后,同時使用上述兩種材料對H5N1病毒進行識別,磁分離后上清液產生隨H5N1濃度變化的PL信號,通過記錄該PL信號最終構建所述病毒分子印跡-適體傳感器; 所述制備方法包括如下步驟: 1ZGO的制備及其適體功能化:將MnNO32和ZnNO32·6H2O混合,先后加入300μL濃度為68wt%的HNO3和1mL1molLNa2GeO3,迅速用NH3·H2O將pH值調節至9.0,室溫下攪拌1h后轉移到聚四氟乙烯高壓反應釜中220℃反應4h,水洗干燥得到ZGO粉末;將得到的ZGO粉末分散在NaOH溶液中攪拌過夜得到羥基化ZGO-OH,隨后超聲分散在DMF中,滴加APTES并在80℃下反應24h得到ZGO-NH2,將活化后的H5N1病毒適體加入到含ZGO-NH2的PBS緩沖液中,37℃振蕩過夜,最后用PBS洗至檢測不到上清液中適體的紫外信號,得到適體功能化的ZGO材料ZGO-H5N1Apt; 2MIP和NIP的制備:將FeCl3·6H2O、NaAc和聚乙二醇混合,通過水熱反應得到Fe3O4納米顆粒,隨后通過加入NH3·H2O和TEOS在Fe3O4納米顆粒表面包覆一層二氧化硅得到Fe3O4@SiO2,將其分散在含MPS的無水乙醇中,室溫攪拌24h得到Fe3O4@SiO2@C=C;取20mgFe3O4@SiO2@C=C超聲分散在DMF溶液中,隨后加入丙烯酰胺、丙烯酸、丙烯酸甲酯和模板病毒H5N1,65℃下攪拌預組裝2h,接著,加入交聯劑MBA和引發劑AIBN并在氮氣氛圍下攪拌30min除氧,65℃聚合6h后,得到的產物用體積比為9:1的甲醇和乙酸的混合溶液反復洗脫除去模板病毒H5N1,直到上清液觀察不到H5N1病毒的熒光信號,從而得到MIP;非印跡聚合物NIP的制備與上述相同,只是沒有添加模板病毒; 3所述病毒分子印跡-適體傳感器的構建:將制備的MIP分散在PBS緩沖液中,加入待檢測的H5N1病毒,在優化的吸附條件下振蕩孵育,隨后,向上述溶液中加入ZGO-H5N1Apt,并在相同條件下振蕩孵育,最后收集磁分離后的上清液,取適量上清液加入比色皿中,在日立F-4600熒光分光光度計上以磷光模式測量并記錄其PL強度,通過計算加入H5N1病毒前后上清液的PL強度差ΔIPL評估H5N1病毒濃度,最終構建一種檢測H5N1病毒的基于持久發光納米材料的病毒分子印跡-適體傳感器; 所述病毒分子印跡-適體傳感器的檢測條件為:激發波長250nm,發射波長:536nm,激發狹縫10nm,發射狹縫10nm。
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