廣東金作農業科技有限公司;廣東省農業科學院作物保護研究所李智軍獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉廣東金作農業科技有限公司;廣東省農業科學院作物保護研究所申請的專利一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色/分色液獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115308005B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210877172.1,技術領域涉及:G01N1/30;該發明授權一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色/分色液是由李智軍;曾晶;譚銘喜;韓玉琴設計研發完成,并于2022-07-25向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色/分色液在說明書摘要公布了:本發明公開了一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色分色液,所述染色液由甲基綠、氯化錳、硫酸錳、乙醇和乙酸組成,所述褪色分色液由三乙醇胺、乙醇和甘油組成。本發明基于甲基綠選擇性與DNA結合,并利用三乙醇胺能使甲基綠褪色以及透明花粉壁的雙重作用,將染色后的褪色、分色及透明過程簡化成一步,不僅花粉質核染色反差清晰,而且染色效果易控,重復性好,同時操作簡便、快捷,具有安全、環保、成本低的優點,可用于十字花科作物花粉以及與其具有類似結構和大小的其它作物花粉發育時期觀察判定,同時還有望在植物分類、不育系轉育以及花粉發育過程基因表達等研究領域獲得應用。
本發明授權一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色/分色液在權利要求書中公布了:1.一種用于簡便整體花粉甲基綠染色法的染色液和褪色分色液,其特征在于:所述染色液由甲基綠、氯化錳、硫酸錳、乙醇和乙酸組成;所述染色液為含0.25%(wv)甲基綠、0.2-1.0%(wv)氯化錳、0-0.5%(wv)硫酸錳、30-40%(vv)乙醇和20-30%(vv)乙酸的混合液; 所述褪色分色液由三乙醇胺、乙醇和甘油組成;所述褪色分色液中各成分的使用體積比設置為三乙醇胺:乙醇:甘油=50-75:50:0-10; 具體操作步驟如下: 步驟一:染色:吸取染色液滴于載玻片上,從花序上摘取需要染色觀察的開放花朵或花蕾,摘取花藥直接放入載玻片上的染色液中,輕輕捏擠花藥,散出花粉,取出雜物,涂抹片刻,然后室溫下靜置染色; 步驟二:褪色分色:直接在染色液斑上滴加褪色分色液,然后蓋上蓋玻片靜置,進行褪色、分色和透明; 步驟三:觀察和拍照記錄:在顯微鏡-OlympusBX51下用MicroPublisher5.0RTV相機拍照記錄,且相機的物鏡放大倍數40倍、目鏡放大倍數10倍。
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