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          中國藥科大學李萍獲國家專利權

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          龍圖騰網獲悉中國藥科大學申請的專利一種多孔硅脫氧核酶熒光探針及在中藥抗癌活性評價中的應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116144737B 。

          龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211571490.1,技術領域涉及:C12Q1/6816;該發明授權一種多孔硅脫氧核酶熒光探針及在中藥抗癌活性評價中的應用是由李萍;王曉宇;李嘉玲;宗晨;許林茹;張蕾設計研發完成,并于2022-12-08向國家知識產權局提交的專利申請。

          一種多孔硅脫氧核酶熒光探針及在中藥抗癌活性評價中的應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種多孔硅脫氧核酶熒光探針及在中藥抗癌活性評價中的應用,該熒光探針包括氨基修飾的多孔二氧化硅納米粒子、裝載于納米粒子孔道中的熒光分子和共價連接在納米粒子表面的DNA發卡HP1、HP2;其中,HP1序列中包含待測microRNA的互補序列,HP2序列中含有鋅離子特異性脫氧核酶的酶切位點;HP1與microRNA結合后,根部被打開,HP1環部發生構型變化并與HP2環部核苷酸序列結合,在鋅離子輔助下激活鋅離子特異性脫氧核酶,繼而在酶切位點處將HP2切斷,納米粒子孔道中熒光分子釋放,通過熒光分子強度實現對microRNA的檢測。該探針能夠特異、靈敏的檢測體系中痕量的microRNA。

          本發明授權一種多孔硅脫氧核酶熒光探針及在中藥抗癌活性評價中的應用在權利要求書中公布了:1.一種檢測microRNA的多孔硅脫氧核酶熒光探針,包括氨基修飾的多孔二氧化硅納米粒子、裝載于所述多孔二氧化硅納米粒子的孔道結構中的熒光分子和共價連接在所述多孔二氧化硅納米粒子表面將所述熒光分子封堵于所述孔道結構內的兩種DNA發卡HP1、HP2;其中,所述HP1的核苷酸序列中包含待測microRNA的互補序列,所述HP2的核苷酸序列中含有鋅離子特異性脫氧核酶的酶切位點;HP1與待測microRNA結合后,根部被打開,HP1環部發生構型變化并與HP2的環部核苷酸序列結合,在鋅離子的輔助下激活鋅離子特異性脫氧核酶,繼而在酶切位點處將HP2切斷,對應的被封堵孔道被打開,裝載于該孔道結構中的熒光分子得以釋放,通過熒光分子強度實現對待測microRNA的檢測; 所述microRNA為microRNA21,DNA發卡HP1、HP2通過如下方法制備:取適量DNA1、DNA2分別與適量三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽常溫混合,還原DNA中的二硫鍵;然后,將還原后的DNA退火處理,常溫靜置,分別得到DNA發卡HP1、DNA發卡HP2; 其中: DNA1的序列為:5’-TTTTGATGTTGATTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGGGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCAACATCAGTCTGATAAGCTA-HS-3’; DNA2的序列為:5’-CGACGACGTTTTTTACCCACTATrAGGAATCAACTTTTTTCGTCGTCGTTTT-HS-3’

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