江蘇海洋大學陳金日獲國家專利權
買專利賣專利找龍圖騰,真高效! 查專利查商標用IPTOP,全免費!專利年費監控用IP管家,真方便!
龍圖騰網獲悉江蘇海洋大學申請的專利一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119715481B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202411865926.7,技術領域涉及:G01N21/64;該發明授權一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法是由陳金日;單蕾;徐冬;李福后;胡曙鋆;王淑軍;黃強;吳少杰;王偉霞;夏振強設計研發完成,并于2024-12-18向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法,其含熒光與比色兩種檢測模式,屬于分析化學技術領域,本發明將雙發夾結構的二價適配體與其互補序列互補,在硼氫化鈉與硝酸銀的作用下,于不同時間與不同溫度下分別形成DNA銀納米簇與DNA吸附的銀納米顆粒。兩種檢測模式下,二價適配體皆為分子識別物,其互補序列皆為信號增強探針,通過檢測熒光、吸光度及智能手機APP分析比色圖像的R+B值,實現快速、超靈敏檢測,該檢測方法操作簡便、高效、靈敏,且在加標實際樣品檢測中回收率和抗干擾能力較好,在氨基糖苷類抗生素類化合物的定性定量分析中具有良好的應用前景。
本發明授權一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法,其特征在于:所述基于二價核酸適配體的雙模式物質智能檢測方法包括熒光檢測模式和比色檢測模式,熒光模式下,二價適配體BivalentApt與互補DNAcDNA堿基互補,使BivalentApt序列的胞嘧啶位置更加分散,導致合成的DNA銀納米簇DNA-AgNCs熒光較弱,加入卡那霉素后BivalentApt構象變化,從而使得合成的DNA-AgNCs熒光顯著增強;比色模式下,BivalentApt與cDNA形成的互補鏈打開了BivalentApt的雙發夾結構,使得BivalentApt更容易吸附于合成的銀納米顆粒AgNPs表面,從而阻止了AgNPs聚集,加入卡那霉素后BivalentApt從AgNPs表面脫落,從而使得合成的AgNPs發生聚集,反應體系顏色由黃色變為灰色,吸光度發生顯著改變,通過檢測熒光、吸光度及智能手機APP分析比色圖像的R+B值,實現快速、超靈敏檢測; 所述BivalentApt序列如SEQIDNO.1所示:GGGACTTGGTTTAGGTAATGAGTCCCGGGACTTGGTTTAGGTAATGAGTCCC;所述cDNA序列如SEQIDNO.2所示:TAAACCAAGTCCG; 所述熒光檢測模式最低檢測限為5.98fmolL,所述熒光檢測模式包括如下步驟: (1)DNA母液的準備:將含有DNA粉末的離心管配平置于離心機中離心,以8000rpmmin轉速離心為30s,待離心結束后添加雙蒸水并震蕩混勻,使得DNA粉末充分溶解,準確定量DNA樣品溶液至100μmolL,于4℃條件下保存備用; (2)BivalentApt序列與cDNA序列的互補:分別取10μL的BivalentApt與cDNA,溶于85μL緩沖液中反應,以形成dsDNA結構,所述緩沖液pH值為8.0; (3)BivalentApt與卡那霉素的識別:向步驟(2)復合物中加入10μL不同濃度的卡那霉素溶液,于37℃條件下反應60min,所述卡那霉素濃度為500fmolL~50nmolL; (4)DNA-AgNCs信號探針的制備:向步驟(3)溶液中加入2μLAgNO3溶液,激烈振蕩5min后冰浴90min,之后向溶液中加入2μLNaBH4溶液避光冰浴240min,即可制得DNA-AgNCs信號探針,完成基于DNA-AgNCs的熒光檢測模式的操作; 所述比色檢測模式包括如下步驟: (1)DNA母液的準備:將含有DNA粉末的離心管配平置于離心機中離心,以8000rpmmin轉速離心30s,待離心結束后添加雙蒸水并震蕩混勻,使得DNA粉末充分溶解,準確定量DNA樣品溶液至100μmolL,于4℃條件下保存備用; (2)BivalentApt序列與cDNA序列的互補:分別取20μL的BivalentApt與cDNA,溶于40μL緩沖液中反應,以形成dsDNA結構,所述緩沖液的pH值為8.5; (3)BivalentApt與卡那霉素的識別:向步驟(2)復合物中加入不同濃度的卡那霉素溶液,于25℃條件下反應120min,所述卡那霉素濃度為0μmolL~500μmolL; (4)適配體模板化銀納米顆粒Apt-templatedAgNPs信號探針的制備:向步驟(3)溶液中加入60μLAgNO3溶液震蕩混勻,冰浴后再加入60μLNaBH4溶液,混合震勻后避光反應5min; (5)智能手機分析圖像R+B值:通過智能手機App測量不同濃度卡那霉素溶液下所合成適配體模板化銀納米顆粒Apt-templatedAgNPs圖像的R+B值,從而得到卡那霉素濃度與R+B值的相關性,完成基于適配體模板化銀納米顆粒Apt-templatedAgNPs的卡那霉素比色智能適配體傳感器的構建。
如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯系本專利的申請人或專利權人江蘇海洋大學,其通訊地址為:222005 江蘇省連云港市海州區江蘇海洋大學;或者聯系龍圖騰網官方客服,聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。
1、本報告根據公開、合法渠道獲得相關數據和信息,力求客觀、公正,但并不保證數據的最終完整性和準確性。
2、報告中的分析和結論僅反映本公司于發布本報告當日的職業理解,僅供參考使用,不能作為本公司承擔任何法律責任的依據或者憑證。