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龍圖騰網獲悉中國科學院大連化學物理研究所申請的專利一種基于可逆化學酶促標記的O-GlcNAc糖肽富集方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN116735726B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-23發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202210210278.6，技術領域涉及：G01N30/02；該發明授權一種基于可逆化學酶促標記的O-GlcNAc糖肽富集方法是由葉明亮;秦洪強;陳堯設計研發完成，并于2022-03-04向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種基于可逆化學酶促標記的O-GlcNAc糖肽富集方法在說明書摘要公布了：本發明公開了一種基于可逆化學酶促標記?親水作用色譜富集的O?GlcNAc糖肽富集方法。具體涉及：基于Endo?M等糖苷內切酶的突變體的轉糖活性進行O?GlcNAc糖肽的化學酶促標記，將帶有噁唑啉結構的N?糖鏈整體轉接到O?GlcNAc糖基上，然后利用親水作用色譜對標記的O?GlcNAc糖肽進行一步富集。針對富集獲得的引入N?糖鏈結構的O?GlcNAc糖肽，利用野生型糖苷內切酶將標記糖鏈切除，實現O?GlcNAc糖肽的無痕富集。與其它O?GlcNAc糖肽富集技術相比，本發明具有O?GlcNAc糖肽富集效率高、操作簡便等優勢，為O?GlcNAc糖蛋白質組學的研究提供了一種新的解決思路和富集方法。

本發明授權一種基于可逆化學酶促標記的O-GlcNAc糖肽富集方法在權利要求書中公布了：1.一種O-GlcNAc糖肽可逆化學酶促標記與富集方法，其特征在于：該方法利用糖苷內切酶Endo-M的N175Q突變體向O-GlcNAc糖基上轉移寡糖鏈以提升親水性，進而利用麥芽糖親水作用色譜材料進行O-GlcNAc延長糖肽的富集；針對富集的糖鏈，利用野生型的糖苷內切酶Endo-MWT和Endo-SWT進行標記糖鏈的切除，獲得生物樣品中的O-GlcNAc糖肽；具體步驟如下： 1O-GlcNAc糖肽的化學酶促標記，具體操作為：以噁唑啉結構的糖鏈CT作為標記試劑，噁唑啉結構的糖鏈CT組成為Gal2GlcNAc3Man3，終濃度為8~10mM，相對分子質量為1419.5，制備方法參見HuangW.etal.,2009,J.Am.Chem.Soc.p.2222，以終濃度為0.4~0.5μgμl的糖苷內切酶Endo-M的N175Q突變體于36~38℃下在pH7.1~7.3的180~220mM磷酸鈉緩沖液中向生物肽段樣品中的O-GlcNAc基團催化標記糖鏈； 2O-GlcNAc標記糖肽的富集，基于延長O-GlcNAc糖肽的親水性強的特征，在室溫下的78~82%乙腈ACN0.9~1.1%三氟乙酸TFA體系中利用環氧疊氮麥芽糖親水作用色譜材料的非共價鍵作用實現對O-GlcNAc標記糖肽的選擇性富集； 3O-GlcNAc糖肽的糖鏈切除，基于糖苷內切酶的酶切活性與特異性，于36~38℃下在pH6.3~6.5的45~55mM磷酸鈉緩沖液中利用野生型的濃度為0.18~0.22μgμl的糖苷內切酶Endo-MWT和終濃度為0.45~0.55μgμl的Endo-SWT進行標記糖鏈的切除，以恢復O-GlcNAc糖基的結構。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人中國科學院大連化學物理研究所，其通訊地址為：116023 遼寧省大連市沙河口區中山路457-41號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。