湖北大學楊世輝獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉湖北大學申請的專利運動發酵單胞菌底盤細胞及其構建方法和應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119875978B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510078892.5,技術領域涉及:C12N1/21;該發明授權運動發酵單胞菌底盤細胞及其構建方法和應用是由楊世輝;張宇杰;劉健;周云峰;胡曉月;耿碧男設計研發完成,并于2025-01-17向國家知識產權局提交的專利申請。
本運動發酵單胞菌底盤細胞及其構建方法和應用在說明書摘要公布了:本發明屬于基因工程技術領域,尤其涉及一種運動發酵單胞菌底盤細胞及其構建方法和應用。該底盤細胞以基因組整合Cas12a基因的運動發酵單胞菌重組菌株為出發菌株,將RecET基因整合到該運動發酵單胞菌重組菌株的基因組,得到大片段基因編輯效率提高的底盤細胞。本發明為運動發酵單胞菌基因組大片段的定向編輯提供了高效的編輯方式,適用于需要頻繁進行基因編輯的底盤細胞的構建,有利于大大節省底盤細胞基因編輯的時間成本;而且,該底盤細胞基因組大大精簡,有利于提高生物元件與途徑的生物合成效率,具有良好的工業化應用價值。
本發明授權運動發酵單胞菌底盤細胞及其構建方法和應用在權利要求書中公布了:1.一種運動發酵單胞菌底盤細胞的構建方法,其特征在于,所述底盤細胞以基因組ZMO0038位點整合有Cas12a基因的運動發酵單胞菌ZMNP-Cas12a為出發菌株,將RecET基因整合到所述運動發酵單胞菌ZMNP-Cas12a基因組的ZMO0028位點,且所述RecET基因上游連接Ptet啟動子,所述Cas12a基因上游連接PBAD啟動子;其中,所述Cas12a基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述RecET基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,所述Ptet啟動子的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示,所述PBAD啟動子的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示; 所述底盤細胞的構建方法包括以下步驟: 獲取基因組ZMO0038位點上游同源臂0038US和下游同源臂0038DS序列,將PBAD啟動子和Cas12a基因串聯在0038US和0038DS序列之間,構建得到第一同源重組質粒; 獲取基因組ZMO0028位點上游同源臂0028US和下游同源臂0028DS,將Ptet啟動子和RecET基因串聯在0028US和0028DS序列之間,構建得到第二同源重組質粒; 將第一同源重組質粒和第二同源重組質粒分別轉化運動發酵單胞菌ZMNP-Cas12a,通過同源重組將PBAD啟動子和Cas12a基因整合進ZMO0038位點且將Ptet啟動子和RecET基因整合進ZMO0028位點,篩選得到運動發酵單胞菌底盤細胞。
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