上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院王鵬飛獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院申請的專利一種檢測并定量膜表面蛋白的探針及其使用方法和應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN117990909B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-09發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410140133.2,技術領域涉及:C12Q1/6886;該發明授權一種檢測并定量膜表面蛋白的探針及其使用方法和應用是由王鵬飛;葉晶;楊棟磊設計研發完成,并于2024-02-01向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種檢測并定量膜表面蛋白的探針及其使用方法和應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種檢測并定量膜表面蛋白的探針,該探針包括檢測探針和計數探針;所述檢測探針靶向膜特征蛋白和在腫瘤發生發展過程中發揮作用的膜表面蛋白。使用方法步驟:當檢測探針和計數探針同時結合到膜上,互補區域結合,在酶的作用下,兩條鏈發生延伸,補足成雙鏈;再對延伸產物進行PCR擴增,提純回收目的條帶送NGS測序;獲得測序結果后對數據進行生信分析,通過對原始數據篩選過濾后得到清潔數據;再與參考序列比對,抓取比對上的數據提取信息,生成蛋白計數矩陣,實現多種膜表面蛋白的精確定量。本發明可以一鍋法同時檢測多種膜表面蛋白,中間不需要清洗步驟,最重要的是本發明設計的表面蛋白檢測方法不依賴于抗體,且能夠做到精確定量。
本發明授權一種檢測并定量膜表面蛋白的探針及其使用方法和應用在權利要求書中公布了:1.一種檢測并定量膜表面蛋白的探針,其特征在于:該探針由檢測探針和計數探針組成;所述檢測探針靶向膜特征蛋白和在腫瘤發生發展過程中發揮作用的膜表面蛋白;所述檢測探針由五部分組成,第一部分是核酸適配體,用于識別表面蛋白;第二部分是PCR的引物結合域,用于后續的PCR擴增;第三部分是檢測探針的分子編碼部分,所述分子編碼部分為UMI,一個UMI代表一個檢測探針;第四部分是核酸適配體的標簽,指示是何種核酸適配體,也指示是何種表面蛋白;第五部分是5nt的互補區域,能夠與計數探針的3'端互補結合,用于后續的延伸;所述計數探針由三部分組成,第一部分是5'端修飾的膽固醇,用于靶向膜的脂質雙分子層;第二部分是PCR反應的引物結合域,同樣用于后續的PCR擴增;第三部分是與檢測探針的3'末端結合的互補序列。
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