買專利賣專利找龍圖騰，真高效！ 查專利查商標用IPTOP,全免費！專利年費監控用IP管家,真方便！

龍圖騰網獲悉西湖大學申請的專利分離、培養雞原始生殖干細胞并構建基因修飾雞的方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN118147052B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-09發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202410428983.2，技術領域涉及：C12N5/0735；該發明授權分離、培養雞原始生殖干細胞并構建基因修飾雞的方法是由裴端卿;王曉民;趙程辰;王鍇鵬;王壯飛;張盛虎設計研發完成，并于2024-04-10向國家知識產權局提交的專利申請。

本分離、培養雞原始生殖干細胞并構建基因修飾雞的方法在說明書摘要公布了：本發明涉及一種分離、培養雞原始生殖干細胞并構建基因修飾雞的方法。在優化培養體系下，體外短期培養可獲得百萬級別細胞并穩定建系，且能夠在體外培養200天以上并維持遷移能力。體外建系的PGCs基因修飾后，通過血管注射方法可以獲得基因修飾雞；同時，注射到雞胚血管的PGCs在孵化第七天分選出來，在體外再培養后再注射到雞胚血管中，可以提高構建基因修飾雞的效率。本發明還涉及到PGCs冷凍，復蘇存活率達到80％以上，可以對分離獲得或是基因修飾后的PGCs進行長期保存。本發明具有分離、培養效率高的優點，同時兩次血管注射的方法可以提高構建基因修飾雞的效率，本發明在雞PGCs體外分離、培養、建系、冷凍保種及構建基因修飾雞等方面具有很好的應用前景。

本發明授權分離、培養雞原始生殖干細胞并構建基因修飾雞的方法在權利要求書中公布了：1.一種基于PGCs二次血管注射方法構建基因修飾雞的方法，其特征在于，包括以下步驟： 構建基因修飾PGCs細胞系； 將得到的基因修飾PGCs細胞系通過外周血管注射的方法注射到發育50-52h的雞胚中并繼續孵化，注射完后在體外繼續孵化到第七天，分離雞胚性腺，獲得PGCs，篩選出基因修飾的PGCs在體外繼續培養擴增，擴增到一定數量后第二次將基因修飾的PGCs通過外周血管注射的方法注射到發育50-52h的雞胚中并繼續孵化，最終獲得基因修飾雞； 其中，構建基因修飾PGCs細胞系的方法為，包括以下步驟： （1）雞胚的準備：將受精種蛋在孵化箱內進行孵化，孵化5-10天時取用； （2）PGCs的分離：從孵化箱中取出孵化5-10天雞胚，分離出性腺，用預熱的PBS清洗，以每個雞胚的一對性腺為一組，0.05%胰酶37℃消化8分鐘后加入PGCs培養基吹打至性腺組織塊成為細胞懸液； （3）將細胞懸液利用差速貼壁法純化PGCs； （4）PGCs的原代培養：用PGCs培養基培養，每天更換培養基，每3-4天傳代一次，更換Feeder飼養層； （5）PGCs傳代培養和建系：將步驟（4）培養所得的原始生殖干細胞在培養至第8天時，以1：3的比例傳代至含有新飼養層的12孔板培養基中，每天更換培養基，獲得建系后PGCs； 從雞胚性腺中分離PGCs并在體外培養擴增，之后對PGCs中基因進行基因修飾，所述基因修飾包括轉基因、基因敲除和基因敲入，得到基因修飾PGCs細胞系，其中，培養條件與PGCs的培養條件相同； 其中，PGCs培養基組成成份為：基礎培養基為KO-DMEM，2％vv）雞血清，20％vv胎牛血清，100丙酮酸鈉，100GlutaMax，100NEAA，1GSnucleosidesupplement，0.1mMβ-巰基乙醇，4ngmlFGF2，6ngmlSCF。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人西湖大學，其通訊地址為：310024 浙江省杭州市西湖區轉塘街道石龍山街18號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。