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龍圖騰網獲悉良渚實驗室申請的專利一種非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞及其制備方法和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN120060155B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-09發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510519104.1，技術領域涉及：C12N5/10；該發明授權一種非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞及其制備方法和應用是由陳瑩瑩;張進;孔娜設計研發完成，并于2025-04-24向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞及其制備方法和應用在說明書摘要公布了：本發明屬于細胞免疫技術領域，涉及一種非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞及其制備方法和應用。所述工程化誘導性多能干細胞的基因組上SIRPA基因中插入有嵌合抗原受體的編碼基因。本發明以SIRPA基因位置定點插入方式編輯iPSC細胞，實現同時敲除SIRPA和整合外源性嵌合抗原受體CAR，可進一步誘導分化為CAR?iMac，使其向單核巨噬細胞腫瘤靶向性細胞分化，增強其吞噬能力，進一步遞呈腫瘤抗原，改善腫瘤免疫微環境，增強抗腫瘤免疫，有效克服了從人體內直接提取天然巨噬細胞相應的問題，降低生產成本和時間成本，利于臨床應用，此外，利用非病毒介導的基因編輯手段，顯著改善遺傳沉默現象。

本發明授權一種非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞及其制備方法和應用在權利要求書中公布了：1.一種制備嵌合抗原受體巨噬細胞的方法，其特征在于，所述制備方法包括： 誘導培養非病毒依賴的工程化誘導性多能干細胞，得到所述嵌合抗原受體巨噬細胞； 所述誘導培養的培養基含有細胞因子；所述細胞因子包括BMP4、bFGF、VEGF、SCF或抑制劑中至少一種； 所述工程化誘導性多能干細胞的基因組上SIRPA基因的6號外顯子中反向插入有嵌合抗原受體的編碼基因； 所述嵌合抗原受體包括前導肽、胞外識別區、鉸鏈區和跨膜胞內信號區、共刺激因子、信號傳遞區和模式識別受體； 所述前導肽、鉸鏈區、跨膜胞內信號區、共刺激因子、信號傳遞區和模式識別受體的氨基酸序列分別如SEQIDNO.4，SEQIDNO.6-SEQIDNO.10所示； 所述胞外識別區包括抗體，所述抗體包括抗GPC3抗體，所述抗GPC3抗體的氨基酸序列包括SEQIDNO.5所示的序列； 所述嵌合抗原受體的編碼基因的核酸序列如SEQIDNO.11所示； 所述工程化誘導性多能干細胞的制備方法包括： 將嵌合抗原受體的編碼基因定點插入誘導性多能干細胞基因組上SIRPA基因中，得到所述工程化誘導性多能干細胞； 所述定點插入的方法為CRISPRCas9法； 所述CRISPRCas9法的sgRNA的核酸序列如SEQIDNO.1所示； 所述CRISPRCas9法的同源重組模版的同源臂的核酸序列如SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人良渚實驗室，其通訊地址為：311121 浙江省杭州市余杭區文一西路1369號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。