三峽大學呂亞豐獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉三峽大學申請的專利一種靶向感染乳腺癌細胞的AAV載體及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115044615B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210461802.7,技術領域涉及:C12N15/864;該發明授權一種靶向感染乳腺癌細胞的AAV載體及應用是由呂亞豐;曹春雨;張浩;黃文峰;黃曉飛;吳紅艷設計研發完成,并于2022-04-28向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種靶向感染乳腺癌細胞的AAV載體及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了靶向乳腺癌細胞的嵌合AAV2衣殼、靶向感染乳腺癌細胞的AAV2載體構建方法、使用所述載體靶向乳腺癌細胞的方法以及攜帶自殺基因治療乳腺癌的方法。本發明通過基因工程技術將EC1蛋白插入到AAV2衣殼表面以及突變VP1蛋白R585、R588位點,獲得一種AAV病毒載體(AAV2M?EC1),與野生型AAV2相比,AAV2M?EC1具有靶向乳腺癌細胞的特性,且大大減少對肝臟、肌肉組織的感染能力。以AAV2M?EC1為載體,攜帶自殺基因HSV?TK,尾靜脈注射移植瘤小鼠后,可顯著抑制小鼠乳腺癌細胞的增殖。
本發明授權一種靶向感染乳腺癌細胞的AAV載體及應用在權利要求書中公布了:1.一種AAV病毒載體的包裝方法,其特征在于,具體包括以下步驟: (1)以AAV2衣殼質粒pRC為模板,通過突變VP1蛋白T138位點為A獲得表達VP1及VP3的pRVP13質粒,衣殼VP13DNA序列為SEQIDNO:1; 質粒RVP13為PCR模板,將衣殼蛋白VP1第585位點精氨酸突變為丙氨酸,第588位點的精氨酸突變為丙氨酸,獲得pRVP13M質粒,衣殼VP13MDNA序列為SEQIDNO:3; (2)以AAV2衣殼質粒pRC為模板,通過對pRC質粒的VP2蛋白M1和M203位點進行定點突變為丙氨酸,獲得質粒pVP2,該質粒提供衣殼蛋白VP2,其DNA序列為SEQIDNO:2;在pVP2質粒基礎上,將EC1蛋白序列插入VP2蛋白氨基端,獲得pVP2-EC1質粒,VP2-EC1DNA序列為SEQIDNO:4; (3)將步驟(1)得到的質粒pRVP13M,步驟(2)得到的質粒pVP2-EC1,pHelper,pAAV組合,構建AAV四質粒包裝系統; (4)將步驟(3)得到的包裝系統,包裝AAV病毒。
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