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龍圖騰網(wǎng)獲悉天津鼎芯膜科技有限公司申請(qǐng)的專利梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN115737794B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-05發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202211386946.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：A61K39/00；該發(fā)明授權(quán)梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法是由張磊;張一琛;李曼晴設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2022-11-07向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法，屬于疫苗生產(chǎn)純化技術(shù)領(lǐng)域，包括如下步驟：1質(zhì)粒DNA純化：取培養(yǎng)完成的菌液進(jìn)行細(xì)胞裂解，裂解后采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到純化質(zhì)粒DNA；2mRNA純化：純化質(zhì)粒DNA經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄、加帽加尾核苷酸修飾得到目標(biāo)mRNA后，加入DNA酶，采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到純化mRNA；3mRNA包封或裝載后純化：純化mRNA包封或裝載后，采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到mRNA疫苗。本發(fā)明方法可減少有機(jī)溶劑的使用，并且有利于實(shí)現(xiàn)mRNA疫苗的大規(guī)模連續(xù)化低成本純化。

本發(fā)明授權(quán)梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜大規(guī)模純化mRNA疫苗的工藝方法，其特征在于，包括如下步驟： 1質(zhì)粒DNA純化： 取培養(yǎng)完成的菌液進(jìn)行細(xì)胞裂解，裂解后采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到純化質(zhì)粒DNA； 2mRNA純化： 純化質(zhì)粒DNA經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄、加帽加尾核苷酸修飾得到目標(biāo)mRNA后，加入DNA酶，采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到純化mRNA； 3mRNA包封或裝載后純化： 純化mRNA包封或裝載后，采用沉淀和或鹽析處理配合梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜過(guò)濾，得到mRNA疫苗； 步驟1-3中， 梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜材質(zhì)分別為聚偏氟乙烯PVDF、聚醚砜PES、聚砜PSF、磺化聚醚砜SPES、改性聚醚砜mPES、改性聚砜mPSF、聚丙烯腈PAN中的至少一種，梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜切割分子量范圍為50KDa-750KDa； 步驟1-3中， 分別采用內(nèi)壓式中空纖維式膜組件進(jìn)行過(guò)濾，組件中梯度孔結(jié)構(gòu)中空纖維超濾膜直徑為0.1-4mm，內(nèi)外徑之比為1.2-4； 過(guò)濾方法為切向流過(guò)濾或死端過(guò)濾； 死端過(guò)濾壓力為0.05-0.3MPa，切向流過(guò)濾流速為15-150Lh﹒m2； 步驟1-3任一步驟過(guò)濾后均通過(guò)試劑I進(jìn)行反沖洗； 反沖洗所用試劑I，包括鹽酸緩沖液Tris-HCl、磷酸緩沖液Tris-H3PO4、乙二胺四乙酸緩沖液Tris-EDTA、乙酸緩沖液Tris-CH3COOH中的至少一種，試劑I的濃度范圍0.1molL～1molL，pH范圍7-10。

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