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龍圖騰網(wǎng)獲悉恰根有限公司申請的專利富集短鏈核酸的方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN105018470B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：201510474196.2，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N15/10；該發(fā)明授權(quán)富集短鏈核酸的方法是由C·瑞特;R·西麥爾里奇;M·韋伯設(shè)計研發(fā)完成，并于2006-12-08向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本富集短鏈核酸的方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明涉及富集長度小于300個核苷酸的核酸的方法，該方法包括以下步驟：i提供流體相，優(yōu)選水相P1，其中含有α1至少一種長度小于300個核苷酸的核酸，和α2至少一種不同于所述核酸α1的組分，ii使所述相P1接觸陰離子交換基質(zhì)以使所述核酸α1結(jié)合在陰離子交換基質(zhì)上，iii任選用洗滌緩沖液洗滌所述陰離子交換基質(zhì)，其中所述核酸α1仍舊結(jié)合于陰離子交換基質(zhì)，和iv從所述陰離子交換基質(zhì)上除去，優(yōu)選洗脫，結(jié)合于陰離子交換基質(zhì)的核酸α1以獲得含有核酸α1的流體相，優(yōu)選水相P2。本發(fā)明還涉及用于富集長度小于300個核苷酸的核酸的試劑盒，涉及所述試劑盒的用途，涉及陰離子交換基質(zhì)的用途，并涉及治療疾病的方法。

本發(fā)明授權(quán)富集短鏈核酸的方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種從血漿或血清的樣品中富集長度小于300個核苷酸的核酸的方法，所述方法包括以下步驟： i用含有0.5moll氯化鈉的裂解緩沖液裂解樣品中所含的細胞，提供流體相P1，其中含有 a1至少一種長度小于300個核苷酸的核酸a1，和 a2至少一種不同于所述核酸a1的組分， ii使所述相P1接觸陰離子交換基質(zhì)以使所述核酸a1結(jié)合于陰離子交換基質(zhì)上，其中所述陰離子交換基質(zhì)包含選自下組的官能團：氨基、肼基和亞胺基， 其中所述陰離子交換基質(zhì)以磁性顆粒上涂層的形式存在， 并且核酸a1與陰離子交換基質(zhì)的結(jié)合在pH為4-6內(nèi)，在存在0.05-0.75moll堿金屬鹽時進行， 其中結(jié)合所述核酸通過連續(xù)攪拌與顆粒接觸的流體相P1來進行， iii隨著磁性聚集體從所述相P1分離磁性顆粒，和用洗滌緩沖液洗滌所述陰離子交換基質(zhì)，其中所述核酸a1仍舊結(jié)合于陰離子交換基質(zhì)，和 iv從所述陰離子交換基質(zhì)上用洗脫緩沖液洗脫結(jié)合于陰離子交換基質(zhì)的核酸a1以獲得含有核酸a1的水相P2， 洗脫緩沖液含有：含1mollTrisCl，pH9.5，400mmollKCl，100mmoll硫酸銨和30mmollMgCl2，其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物； 洗脫緩沖液含有100mmollNaCl，250mmollNaCl，400mmollNaCl，100mmollKCl，250mmollKCl或400mmollKCl，其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物； 洗脫緩沖液含有10-50mmollCaCl2，其中所述核酸a1是miRNA；或 洗脫緩沖液含有25-200mmoll的氯化銨或硫酸銨，其中所述核酸a1是miRNA。

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