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龍圖騰網獲悉綿陽師范學院申請的專利高純度豬圓環病毒4型Cap蛋白的制備方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115477694B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202210596791.3，技術領域涉及：C07K14/01；該發明授權高純度豬圓環病毒4型Cap蛋白的制備方法是由陳希文;伍春平;尹苗;易浩楠;吳倩;趙洪設計研發完成，并于2022-05-30向國家知識產權局提交的專利申請。

本高純度豬圓環病毒4型Cap蛋白的制備方法在說明書摘要公布了：本發明涉及Cap38～228蛋白制備技術領域，尤其涉及高純度豬圓環病毒4型Cap蛋白的制備方法。步驟包括S1.基于PCV4Cap蛋白和His?SUMO標簽的核苷酸序列，構建帶雙標簽的原核表達載體pET?28a?His?SUMO?Cap38～228；S2.以pET?28a?His?SUMO?Cap38～228轉化大腸桿菌感受態細胞BL21，以IPTG進行誘導表達，并對表達條件進行優化，制備出目的蛋白His?SUMO?Cap38～228；同時經Ni?NTA親和層析柱對目的蛋白His?SUMO?Cap38～228純化；S3.His?SUMO?Cap38～228經SUMO蛋白酶酶切后，再次用Ni?NTA親和層析柱去除His?SUMO標簽，獲得Cap38～228。本發明可有效制備出高純度的PCV4Cap38～228蛋白，其純度大于95％，為血清學診斷、Cap蛋白的多抗或單抗以及亞單位疫苗研發提供了PCV4Cap38～228蛋白制備的技術基礎。

本發明授權高純度豬圓環病毒4型Cap蛋白的制備方法在權利要求書中公布了：1.高純度豬圓環病毒4型Cap38~228蛋白的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： S1.基于PCV4Cap蛋白和His-SUMO標簽的核苷酸序列，構建帶雙標簽的原核表達載體pET-28a-His-SUMO-Cap38~228； 主要包括： 以PCV4GX2020FCG49毒株Cap蛋白核苷酸序列為基礎，進行大腸桿菌密碼子偏好性優化； 在Cap蛋白核苷酸的N端加入His-SUMO標簽的核苷酸序列構建His-SUMO-Cap38~228目標序列； 在His-SUMO-Cap38~228目標序列的N端加入RBS序列及翻譯起始信號，同時，在該序列5’和3’端分別加入XbaI和HindⅢ酶切位點； 將所述目標序列和pET-28a載體質粒分別經XbaI和HindⅢ雙酶切后，進行膠回收雙酶切產物，并使用T4DNA連接酶于16℃條件下連接過夜，制備出連接產物； 將連接產物轉化DH5α感受態細胞，挑取單克隆菌落擴大培養，并利用質粒提取試劑盒提取重組質粒pET-28a-His-SUMO-Cap38~228，用XbaI和HindⅢ進行雙酶切鑒定，并測序鑒定目標序列的正確插入，最終構建獲得pET-28a-His-SUMO-Cap38~228表達載體； S2.以pET-28a-His-SUMO-Cap38~228轉化大腸桿菌感受態細胞BL21，以IPTG進行誘導表達，并對表達條件進行優化，制備出目的蛋白His-SUMO-Cap38~228；同時經Ni-NTA親和層析柱對目的蛋白His-SUMO-Cap38~228純化； 其中，對表達條件進行優化，包括：設置誘導時間為10h；設置誘導溫度為20℃-30℃；設置IPTG濃度為0.2mmolL； S3.His-SUMO-Cap38~228經SUMO蛋白酶酶切后，再次用Ni-NTA親和層析柱去除His-SUMO標簽，獲得Cap38~228。

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