浙江大學;浙江大學濱江研究院王平獲國家專利權
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龍圖騰網(wǎng)獲悉浙江大學;浙江大學濱江研究院申請的專利基于AuNPs/HRP/FeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21-1檢測試劑盒及應用獲國家發(fā)明授權專利權,本發(fā)明授權專利權由國家知識產(chǎn)權局授予,授權公告號為:CN115372347B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權局官網(wǎng)在2025-09-23發(fā)布的發(fā)明授權授權公告中獲悉:該發(fā)明授權的專利申請?zhí)?專利號為:202210595270.6,技術領域涉及:G01N21/78;該發(fā)明授權基于AuNPs/HRP/FeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21-1檢測試劑盒及應用是由王平;王心怡;孔留兵;黃卓如;房瑞山;萬浩設計研發(fā)完成,并于2022-05-28向國家知識產(chǎn)權局提交的專利申請。
本基于AuNPs/HRP/FeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21-1檢測試劑盒及應用在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種基于AuNPsHRPFeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21?1檢測試劑盒及應用,該試劑盒包括如下物質(zhì):包被后96孔聚苯乙烯微孔板、AuNPsHRPFeMOF溶液、PBST溶液和TMB顯色液。取50μl樣本溶液和50μlFeMOFAuNPsHRP@Ab溶液加入到包被后96孔聚苯乙烯微孔板中。反應1小時后用PBST溶液洗板4次后,在反應后的溶液中加入100μLTMB顯色液反應15分鐘,將反應好的96孔聚苯乙烯微孔板放入酶標儀中,定點掃描波長650nm處的吸光度。本發(fā)明利用FeMOF和AuNPs對抗體的高結合力以及過氧化物酶催化活性和HRP結合進行級聯(lián)信號放大,通過加入顯色液對Cyfra21?1進行定量檢測。本發(fā)明試劑盒的檢測下限低,操作簡單,保存時間長。
本發(fā)明授權基于AuNPs/HRP/FeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21-1檢測試劑盒及應用在權利要求書中公布了:1.一種基于AuNPsHRPFeMOF協(xié)同的唾液中Cyfra21-1檢測試劑盒,其特征在于,包括如下物質(zhì):包被后96孔聚苯乙烯微孔板、AuNPsHRPFeMOF溶液、PBST溶液和TMB顯色液; 所述包被后96孔聚苯乙烯微孔板是:用pH9.6的碳酸鹽緩沖液將Cyfra21-1包被抗體稀釋至2.84μgmL,然后用移液槍吸取稀釋后抗體至96孔板,每孔包被量為100μL,在4℃下靜置12小時;用PBST洗滌液洗滌多孔板4次,然后用質(zhì)量分數(shù)為2%的BSA溶液封閉空余結合位點,每孔200μL,在37℃下靜置2小時;用PBST洗滌液洗滌多孔板4次后所得; 所述AuNPsHRPFeMOF溶液是:將0.1MK2CO3溶液加入0.05mgmlAuNPs溶液中,體積比為1:67,向混合溶液中加入8μl10μgmLHRP溶液,在25℃下混合2小時;所獲得的溶液與等體積0.001gmLFeMOF溶液在25℃下混合4小時;取反應后的溶液在14000rpm轉(zhuǎn)速下離心5分鐘;將沉淀用1mMPBS潤洗,重復3次;取潤洗后的沉淀溶解在1mMPBS中;然后再加入等體積的質(zhì)量分數(shù)為5%的BSA溶液,混合2小時;取反應后的溶液在14000rpm轉(zhuǎn)速下離心5分鐘;將沉淀用1mMPBS潤洗,重復3次,取離心后的沉淀溶解在1mMPBS中; 所述HRP溶液是:用HRP修飾的Cyfra21-1檢測抗體溶液; 所述PBST溶液是:0.01MPBS和質(zhì)量分數(shù)為0.01%Tween-20的混合溶液; 所述TMB顯色液是:用10mMpH4.0醋酸醋酸鈉緩沖液稀釋后的100mMH2O2和TMB的等體積混合溶液; 具體檢測過程為:取50μl唾液樣本溶液和50μlAuNPsHRPFeMOF溶液加入到包被后96孔聚苯乙烯微孔板中;反應1小時后用PBST洗滌液洗板4次后,在反應后的溶液中加入100μlTMB顯色液反應15分鐘,將反應好的96孔聚苯乙烯微孔板放入酶標儀中,定點掃描波長650nm處的吸光度,根據(jù)吸光度的結果判斷唾液樣本溶液中Cyfra21-1含量。
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