硅羿科技(上海)有限公司朱寶玉獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉硅羿科技(上海)有限公司申請的專利一種dsRNA標準品的純化和制備方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120290548B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510781182.9,技術領域涉及:C12N15/10;該發明授權一種dsRNA標準品的純化和制備方法是由朱寶玉;莫芹;鄧廷山;徐銘;王奕翔設計研發完成,并于2025-06-12向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種dsRNA標準品的純化和制備方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種dsRNA標準品的純化和制備方法。本發明采用兩步層析法制備的dsRNA標準品,在離子交換層析純化步驟,本發明采用堿性氨基酸添加的方法,降低了長鏈dsRNA與層析填料的相互作用力,增加了鹽溶液洗脫強度,提高了回收率,解決了dsRNA標準品制備當中純化回收率低的問題。本發明提供的方法具有高效和低成本的特點,采用線性化的質粒作為體外轉錄模板的載體,可以實現大規模體外轉錄,一批次能夠獲得克級dsRNA產物,能夠滿足核酸農藥領域登記和生產質量檢測的標準品需求。
本發明授權一種dsRNA標準品的純化和制備方法在權利要求書中公布了:1.一種dsRNA標準品的制備方法,其特征在于,所述方法包括體外轉錄模板制備,dsRNA粗溶液制備,dsRNA初純液制備和dsRNA精純液制備的過程; 所述dsRNA粗溶液制備過程中,包括向體外轉錄的反應液中加入DNase消化,加入蛋白酶消化和濾膜過濾的步驟; 所述dsRNA初純液制備過程包括離子交換層析,所述離子交換層析包括柱平衡,上樣和洗脫的步驟;所述離子交換層析為陰離子交換層析;所述上樣步驟包括將dsRNA溶液用上樣緩沖液稀釋后上樣至離子交換層析柱,所述上樣緩沖液包括300~400mM精氨酸; 所述dsRNA精純液制備過程中,包括將dsRNA初純液進行第一次膜包換液,疏水層析純化,再進行第二次膜包換液的步驟。
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