中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院蘇良平獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院申請的專利一種頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN116004539B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-19發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202310055618.7,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C12N5/09;該發(fā)明授權(quán)一種頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用是由蘇良平;黃炳培;黃城設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2023-01-16向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本一種頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用,屬于腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域。所述共培養(yǎng)系統(tǒng)的構(gòu)建方法是將頭頸部鱗癌組織酶消化后,分別培養(yǎng)成成纖維細(xì)胞系和類器官組織,然后使用類器官培養(yǎng)基,進(jìn)行共培養(yǎng)。本發(fā)明共培養(yǎng)獲得的類器官細(xì)胞干性增強(qiáng)3?5倍,耐藥性增強(qiáng)5?7倍,而且方法操作簡便,耗時(shí)少,可在1h內(nèi)完成細(xì)胞分離和類器官的培養(yǎng)。本發(fā)明為建立類器官庫、開展藥物篩選和促進(jìn)臨床轉(zhuǎn)化提供了基礎(chǔ)。
本發(fā)明授權(quán)一種頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了:1.一種具有高耐藥性和高干性的頭頸部鱗癌組織類器官的構(gòu)建方法,其特征在于:包括如下步驟: (1)取新鮮頭頸部鱗癌組織,剪切后分成兩份; (2)取其中一份,加入組織消化液消化,用100μm的濾網(wǎng)過濾,濾過液離心取沉淀,用DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng),得到頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞; (3)取另一份,加入類器官消化液消化,用70μm的濾網(wǎng)過濾,濾過液離心取沉淀,加入紅細(xì)胞裂解液,混勻,反應(yīng),加入清洗液清洗,離心取沉淀,沉淀即為頭頸部鱗癌喉癌單細(xì)胞;將所得頭頸部鱗癌喉癌單細(xì)胞與基質(zhì)膠混勻后,加入改進(jìn)的類器官培養(yǎng)基培養(yǎng),得到頭頸部鱗癌組織類器官; (4)將步驟(2)所得頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞和步驟(3)所得頭頸部鱗癌組織類器官分別進(jìn)行消化;Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室;將消化所得頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞接種到上室,消化所得頭頸部鱗癌組織類器官接種到下室,加入改進(jìn)的類器官培養(yǎng)基進(jìn)行共培養(yǎng),即獲得所述的頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng); (5)取步驟(4)所得頭頸部鱗癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與類器官共培養(yǎng)系統(tǒng),取出transwell小室,拿走上層的成纖維細(xì)胞,即獲得所述的具有高耐藥性和高干性的頭頸部鱗癌組織類器官; 所述的改進(jìn)的類器官培養(yǎng)基的組成如下:含有20ngmlWnt-3a,5ngmlR-spondin1,1×B27Supplement,10mmolLNicotinamide,1.25mmolLN-acetylcsteine,100μgmlPrimocin,50ngmlmNoggin,50ngmlhEGF,100ngmlhFGF,10nmolLGastrinI,500nmolLA83-01,10.5μmolLY-27632,10mmolLHEPES,1×GlutaMAXSupplement的AdvancedDMEMF-12培養(yǎng)基; 所述的類器官消化液每份的組成如下:含有10μgmlCollagenaseII、10μgmlDNAseⅠ和10.5μmolLY-27632的advancedDMEMF12培養(yǎng)基。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院,其通訊地址為:510120 廣東省廣州市越秀區(qū)沿江西路107號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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