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龍圖騰網獲悉天津科技大學申請的專利一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN120098883B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510592031.9，技術領域涉及：C12N1/21；該發明授權一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和應用是由范曉光;付永康;溫昊妍;陸盼;徐慶陽;陳寧設計研發完成，并于2025-05-09向國家知識產權局提交的專利申請。

本一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和應用在說明書摘要公布了：本發明屬于基因工程技術領域，公開一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ?氨基丁酸的基因工程菌、方法和應用，工程菌是在野生型E.coliMG1655的基礎上，過表達T7RNA聚合酶基因；缺失基因gabT和puuE；過表達gadC、gadbm、gdh、gltA、pyc、ppc基因；使用生長偶聯型啟動子動態調控大腸桿菌生產GABA通路中的sucA和argA基因表達。本工程菌的基因操作均在基因組上進行，無質粒殘留，無抗生素及誘導劑使用，生產性能穩定，發酵過程簡單。利用工程菌在分階段pH值控制工藝下發酵38h，γ?氨基丁酸產量可達到35.4gL，具有較好的工業應用價值。

本發明授權一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和應用在權利要求書中公布了：1.一株無質粒、以廉價碳源為底物從頭高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌，其特征在于：所述基因工程菌是在野生型大腸桿菌E.coliMG1655的基礎上，過表達噬菌體來源的T7RNA聚合酶基因T7RNAP，由木糖啟動子P xylF 控制；缺失了GABA轉氨酶基因gabT和puuE；過表達大腸桿菌內源的GABA轉運蛋白酶基因gadC；過表達巨大芽孢桿菌來源的谷氨酸脫羧酶基因gad bm ；過表達谷氨酸棒狀桿菌來源的谷氨酸脫氫酶基因gdh即cgl2079；過表達大腸桿菌內源的檸檬酸合酶基因gltA；過表達谷氨酸棒狀桿菌來源的丙酮酸羧化酶基因pyc即cgl0689；過表達大腸桿菌內源的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc；使用生長偶聯型啟動子P rpst 動態調控大腸桿菌生產GABA通路中的2-酮戊二酸脫氫酶基因sucA和氨基酸N-乙酰轉移酶基因argA； 所述基因gabT在GeneBank的登記號為GeneID948067，基因puuE在GeneBank的登記號為GeneID945446，基因gadC在GeneBank的登記號為GeneID946057，基因gad bm 在GeneBank的登記號為KT895523.1，基因gdh在GeneBank的登記號為GeneID1020031，基因gltA在GeneBank的登記號為GeneID945323，基因pyc在GeneBank的登記號為GeneID1019553，基因ppc在GeneBank的登記號為GeneID948457，基因sucA在GeneBank的登記號為GeneID945303，基因argA在GeneBank的登記號為GeneID947289； 基因T7RNAP的序列為SEQIDNO.1；木糖啟動子P xylF 的序列為SEQIDNO.2；三種生長偶聯型啟動子中P rpst 的序列為SEQIDNO.3； 所述的基因工程菌的構建方法，所述方法是采用CRISPRCas9介導的基因編輯技術對E.coliMG1655基因組進行定向改造； 具體步驟如下： （1）在大腸桿菌E.coliMG1655基因組上lacI-lacZ位點整合T7噬菌體來源的RNA聚合酶基因T7RNAP，由木糖啟動子P xylF 控制； （2）敲除GABA轉氨酶基因gabT； （3）敲除GABA轉氨酶基因puuE； （4）在假基因位點yjgX整合大腸桿菌內源的GABA轉運蛋白酶基因gadC，由P trc 啟動子控制； （5）在假基因位點yciQ整合來自巨大芽孢桿菌內源的谷氨酸脫羧酶基因gad bm ，由PT7啟動子控制； （6）在假基因位點mbhA整合來自谷氨酸棒狀桿菌的谷氨酸脫氫酶基因gdh即cgl2079，由強啟動子P trc 控制； （7）在假基因位點ylbE整合來自大腸桿菌內源的檸檬酸合酶基因gltA,由P trc 啟動子控制； （8）在假基因位點yghE整合來自谷氨酸棒狀桿菌來源的丙酮酸羧化酶基因pyc即cgl0689，由P trc 啟動子控制； （9）在假基因位點gapC整合來自大腸桿菌內源的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc； （10）使用生長偶聯型啟動子P rpst 替換2-酮戊二酸脫氫酶基因sucA的天然啟動子； （11）使用生長偶聯型啟動子P rpst 替換氨基酸N-乙酰轉移酶基因argA的天然啟動子。

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