安徽醫(yī)科大學(xué)趙潔旻獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉安徽醫(yī)科大學(xué)申請的專利一種工程化DNA晶體結(jié)晶后功能化方法和應(yīng)用獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN117384231B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-12發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202311154931.2,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C07H21/04;該發(fā)明授權(quán)一種工程化DNA晶體結(jié)晶后功能化方法和應(yīng)用是由趙潔旻;馮昕瑜;張玲玲;韋書恒;徐莉設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2023-09-08向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本一種工程化DNA晶體結(jié)晶后功能化方法和應(yīng)用在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開一種工程化DNA晶體結(jié)晶后功能化方法和應(yīng)用。本發(fā)明構(gòu)建了剛性的三角形張拉結(jié)構(gòu)基元,包括3種不同的DNA組成鏈,共7條鏈,邊鏈在三個雙螺旋方向延伸,具有三次重復(fù)序列的中心鏈位于結(jié)構(gòu)基元的中央。每個雙螺旋結(jié)構(gòu)的兩端各帶有2個堿基的粘性末端,其互相作用形成非常有序的3D晶體網(wǎng)絡(luò)。使用T4DNA連接酶連接粘性末端,得到穩(wěn)定的DNA晶體。本發(fā)明的晶體結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,目的中心鏈可以添加復(fù)雜修飾,具有普適性,該晶體在醫(yī)學(xué)疾病檢測中具有廣泛的用途。
本發(fā)明授權(quán)一種工程化DNA晶體結(jié)晶后功能化方法和應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了:1.一種工程化DNA晶體的功能化方法,其特征在于,將所述工程化晶體浸泡在DMSO中,然后吸去DMSO,用1×TAEMg清洗晶體8-10次,再向晶體液滴滴加功能性的中心鏈,移液槍抽吸混合均勻,靜置過夜即可; 所述中心鏈?zhǔn)荓4鏈或L-CY5鏈; 所述L4鏈的核苷酸序列為:5’-GAGGAAAAAAAAAAATCCTCCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; L-CY5鏈:5’-CGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; 所述工程化DNA晶體的制備方法包括如下步驟: (1)將組成三角形張拉結(jié)構(gòu)基元的三條DNA單鏈按照化學(xué)計(jì)量比混合,從95℃逐漸降溫至4℃,形成相應(yīng)的基元模塊;所述三條DNA單鏈分別為中心鏈L鏈、邊鏈M鏈、角鏈S鏈,每條S鏈的兩端部分分別與兩條M鏈的一個末端部分互補(bǔ)配對,互補(bǔ)配對堿基數(shù)分別為12個或11個;并且(1)每條M鏈和S鏈的粘性末端為兩個堿基長度;(2)每條M鏈為42個堿基長度;且從5'端到3'端被分成三段,各段堿基數(shù)需為13、17、12;(3)每條L鏈為三段重復(fù)序列,并在三角形張拉結(jié)構(gòu)基元的中心分別與三條M鏈中間部分互補(bǔ)配對,L鏈與每條M鏈互補(bǔ)配對的長度為17個堿基; 其中,L鏈:5’-CGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; M鏈:5’-GAAAAACACTGCCTGAATACCGCATCGTGGACTGACTCAAAA-3’; S鏈:5’-TCTTTTGAGTCAGTGGCAGTGTTTT-3’; 且每條DNA單鏈的最終濃度為2~6μM; (2)用懸滴蒸氣擴(kuò)散法進(jìn)行結(jié)晶,得到晶體;結(jié)晶條件:在30-35℃,結(jié)晶溶液鹽濃度為0.4-0.6×TAEMg,結(jié)晶液池鹽濃度為4-6×TAEMg條件下進(jìn)行; (3)將加固溶液加入第(2)步得到晶體溶液中,過夜即得到加固好的工程化DNA晶體;所述加固溶液包括8-12×TAEMg、8-12mMATP、400-1000UμLT4DNA連接酶和水。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人安徽醫(yī)科大學(xué),其通訊地址為:230022 安徽省合肥市梅山路81號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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