良渚實驗室孟紅恩獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉良渚實驗室申請的專利一種用于從組織中分離微生物的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN118834758B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410961946.8,技術領域涉及:C12N1/02;該發明授權一種用于從組織中分離微生物的方法是由孟紅恩;王永成設計研發完成,并于2024-07-17向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種用于從組織中分離微生物的方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種用于從組織中分離微生物的方法。使用一種含有表面活性劑TritonX100的裂解液進行細胞的裂解,通過表面活性劑TritonX100對細胞的細胞膜進行破裂而不會破壞含細胞壁的細菌從而保持細菌完整的結構可用于后續的宏基因組宏轉錄組乃至單細菌基因組轉錄組高通量測序。本發明的方法能夠高效、準確地從腫瘤組織中分離微生物,提高了微生物的分離效率和純度,避免了現有方法中微生物種類丟失的問題。本發明的方法適用于微生物組高通量測序,能夠為腫瘤微生物組的研究提供高質量的樣本和數據支持。本發明的方法操作簡單、成本低廉,具有廣泛的應用前景和臨床價值。
本發明授權一種用于從組織中分離微生物的方法在權利要求書中公布了:1.一種用于從組織中分離微生物的方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)獲取待處理的組織,使用預冷的含RNA酶抑制劑的緩沖液清洗組織,然后將組織切碎;待處理的組織為結直腸腫瘤組織; (2)加入裂解液進行裂解;裂解時間為3~15min;所述裂解液包括終濃度為0.01wt%~0.10wt%的TritonX100,10mMpH7.5的Tris-HCl,146mMNaCl,1mMCaCl2,21mMMgCl2,60UmlRNA酶抑制劑,0.01wt%BSA; (3)將裂解后的產物進行過濾,并收集濾液,將濾液離心去除雜質取上清液; (4)將步驟(3)所得上清液離心分離出組織內的細菌; 裂解完成后,加入洗滌緩沖液終止裂解反應,所述洗滌緩沖液為10mMpH7.5Tris-HCl,146mMNaCl,1mMCaCl2,21mMMgCl2,60UmlRI,0.01%BSA; 步驟(3)中,將濾液離心去除雜質時,離心力為500g; 步驟(4)中,上清液離心分離出組織內的細菌時,離心力為3910g。
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