合肥工業大學智能制造技術研究院;國家食品安全風險評估中心沈益忠獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉合肥工業大學智能制造技術研究院;國家食品安全風險評估中心申請的專利一種基于分子印跡調節Co@MOF-MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN118190892B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-09發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410427275.7,技術領域涉及:G01N21/64;該發明授權一種基于分子印跡調節Co@MOF-MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法是由沈益忠;吳國建;駱鵬杰;吳永寧設計研發完成,并于2024-04-10向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于分子印跡調節Co@MOF-MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法在說明書摘要公布了:一種基于分子印跡調節Co@MOF?MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法,包括下列步驟:步驟1:測定氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在650nm處吸光度值An;步驟2:在365nm波長激發下,測定氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在440nm處熒光強度值Fn;步驟3:測定氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在660nm激光照射下的溫度Tn:步驟4:構建氨基甲酸乙酯濃度的線性回歸方程;步驟5:取待測樣品,重復步驟1、步驟2和步驟3獲得比色模式吸光度信號、熒光模式的熒光強度信號以及光熱模式的溫度信號Tn。Co@MOF?MIP納米酶的合成工藝相對簡單,原料易得且成本較低,不需要復雜的工藝和昂貴的設備,具有較高的穩定性,同時具有高過氧化物酶活性和熒光特性,滿足了后續多模態檢測EC的需要。
本發明授權一種基于分子印跡調節Co@MOF-MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種基于分子印跡調節Co@MOF-MIP酶活開關的氨基甲酸乙酯三模態檢測方法,其特征在于:包括下列步驟: 步驟1:測定含有不同濃度的氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在650nm處吸光度值An,并用安裝了ColorPickerApp的智能手機收集比色信號,將其轉化為RGB值,記錄為比色模式下的BRnC: 將20.0μL的不同濃度的氨基甲酸乙酯標準品溶液、10.0μL的濃度為1.0mgmL的Co@MOF-MIP納米酶溶液、10.0μL的濃度為20.0mmolL的3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶液和20.0μL的濃度為2.0mmolL的H2O2在離心管中混合,然后加入pH值為3.8-4.2的HAc-NaAc緩沖液并定容至200.0μL,反應14.0-18.0min后移至比色皿中,用紫外分光光度計測量650nm處吸光度值,記為吸光度值An;接著,用安裝了ColorPickerApp的智能手機捕捉溶液的比色信號,將其轉化為RGB值,記錄BRnC; 步驟2:在365nm波長激發下,測定含有不同濃度的氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在440nm處熒光強度值Fn,并用安裝了ColorPickerApp的智能手機收集熒光信號,將其轉化為RGB值,記錄為熒光模式下的BRnF: 將20.0μL的不同濃度的氨基甲酸乙酯標準品溶液、10.0μL的濃度為1.0mgmL的Co@MOF-MIP納米酶溶液、10.0μL的濃度為20.0mmolL的3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶液和20.0μL的濃度為2.0mmolL的H2O2在離心管中混合,然后加入pH值為3.8-4.2的HAc-NaAc緩沖液并定容至200.0μL,反應14.0-18.0min后移至熒光比色皿中,在365nm波長激發下,用熒光分光光度計測量440nm處的熒光強度值,記為熒光值Fn;接著在365nm波長激發下,用安裝了ColorPickerApp的智能手機捕捉溶液的熒光信號,將其轉化為RGB值,記錄BRnF; 步驟3:測定含有不同濃度的氨基甲酸乙酯的混合反應溶液在660nm激光照射下的溫度Tn: 將20.0μL的不同濃度的氨基甲酸乙酯標準品溶液、10.0μL的濃度為1.0mgmL的Co@MOF-MIP納米酶溶液、10.0μL的濃度為20.0mmolL的3,3',5,5'-四甲基聯苯胺溶液和20.0μL的濃度為2.0mmolL的H2O2在離心管中混合,然后加入pH值為3.8-4.2的HAc-NaAc緩沖液并定容至200.0μL,反應14.0-18.0min后用660nm激光照射后并使用便攜式光熱成像儀測量溫度數值,記為溫度值為Tn; 步驟4:構建氨基甲酸乙酯濃度與比色模式下吸光度An、BRnC,熒光模式下的Fn、BRnF以及光熱模式下的溫度Tn的線性回歸方程: 根據氨基甲酸乙酯系列濃度的標準品測試獲得吸光度信號An和BRnC,構建線性方程,An=XCEC+y和BRnC=XCEC+y,其中CEC為氨基甲酸乙酯標準品濃度; 根據氨基甲酸乙酯系列濃度的標準品測試獲得熒光強度信號Fn和BRnF,構建線性方程,Fn=XCEC+y和BRnF=XCEC+y,其中CEC為氨基甲酸乙酯標準品濃度; 根據氨基甲酸乙酯系列濃度的標準品測試獲得溫度信號Tn,構建線性方程,Tn=XCEC+y,其中CEC為氨基甲酸乙酯標準品濃度; 步驟5:取待測樣品,重復步驟1、步驟2和步驟3獲得比色模式吸光度信號An和BRnC、熒光模式的熒光強度信號Fn和BRnF以及光熱模式的溫度信號Tn,將An和BRnC、Fn和BRnF和Tn代入相應的線性方程,獲得待測樣品中的氨基甲酸乙酯的濃度; 所述Co@MOF-MIP納米酶的制備方法包括下列步驟: S1:將CoNO32·6H2O和對苯二甲酸溶解在N,N-二甲基甲酰胺中,然后轉移至高溫反應釜中在100-120℃下反應10-30h;冷卻至室溫后,在10000-14000rpm離心機下離心5-15min,用DMF和超純水洗滌,然后凍干成粉末備用,得到Co@MOF納米酶; S2:在燒瓶中加入Co@MOF納米酶、四苯乙烯和0.2mmolL氨基甲酸乙酯,加入乙醇,并超聲至溶解;然后將羧基乙基硅烷三醇鈉鹽和四醋酸硅放入燒瓶中,在黑暗條件下持續攪拌25-40min后,向混合物中加入氨水,并在20-30℃下持續攪拌過夜;沉淀物用乙醇洗滌,離心后棄去上清液;用甲醇索氏提取法提取沉淀中的原始氨基甲酸乙酯模板,得到Co@MOF-MIP溶膠凝膠;聚合物干燥后得到Co@MOF-MIP納米酶。
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