浙江工業大學柳志強獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉浙江工業大學申請的專利一種產赤蘚糖醇的基因工程菌、構建方法及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116179382B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211301011.4,技術領域涉及:C12N1/19;該發明授權一種產赤蘚糖醇的基因工程菌、構建方法及應用是由柳志強;肖博文;黃良剛;張博;周俊平;鄭裕國設計研發完成,并于2022-10-24向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種產赤蘚糖醇的基因工程菌、構建方法及應用在說明書摘要公布了:本發明涉及一種赤蘚糖醇的基因工程菌株及其構建方法,以及其在微生物發酵制備赤蘚糖醇中的應用。本發明在解脂耶氏酵母中引入木糖還原酶、木糖醇脫氫酶以及木糖醇激酶重塑了木糖代謝途徑,強化赤蘚糖醇生物生成途徑中轉酮酶TKL1、轉醛酶TAL、赤蘚糖還原酶ER的表達,通過敲除甘露糖醇脫氫酶MDH和阿拉伯糖醇脫氫酶ArDH來減少副產物甘露糖醇和阿拉伯糖醇的生成,通過敲除赤蘚糖醇脫氫酶EYD減少赤蘚糖醇轉化為其他物質削弱赤蘚糖醇的積累,通過強化糖攝取途徑基因己糖激酶HK、轉運蛋白Stp1和Stp2的表達,最后可利用葡萄糖和木糖混合碳源的赤蘚糖醇高產菌,產量從50.17gL提高到195.56gL,為以木糖為底物合成赤蘚糖醇工業化生產提供了優良菌株來源,具有很好的工業應用潛力。
本發明授權一種產赤蘚糖醇的基因工程菌、構建方法及應用在權利要求書中公布了:1.產赤蘚糖醇的基因工程菌,由如下方法構建獲得: (1)以解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)AJD為底盤菌,過表達編碼木糖還原酶的基因XR、編碼木糖醇脫氫酶的基因XDH和編碼木酮糖激酶的基因XK,得到工程菌YarrowialipolyticaXR:XDH:XK,記為ERY1; (2)將工程菌ERY1基因組中的赤蘚糖醇脫氫酶EYD基因敲除,得到工程菌YarrowialipolyticaXR:XDH:XKΔEYD,記為ERY2; (3)將工程菌ERY2基因組中的甘露糖醇脫氫酶基因MDH敲除,得到工程菌Yarrowia lipolyticaXR:XDH:XKΔEYDΔMDH,記為ERY3; (4)將工程菌ERY3基因組中的阿拉伯糖醇脫氫酶基因ArDH敲除,得到工程菌Yarrowia lipolyticaXR:XDH:XKΔEYDΔMDHΔArDH,記為ERY4; (5)以工程菌ERY4為底盤菌,過表達磷酸戊糖途徑非氧化模塊基因轉酮酶TKL1、轉醛酶TAL和赤蘚糖還原酶ER,得到工程菌YarrowialipolyticaXR:XDH:XKΔEYDΔMDHΔArDH:TKL1:TAL:ER,記為ERY5; (6)以工程菌ERY5為底盤菌,過表達己糖激酶基因HK、糖轉運蛋白1基因Stp1和糖轉運蛋白2基因Stp2,得到工程菌YarrowialipolyticaXR:XDH:XKΔEYDΔMDHΔArDH:TKL1:TAL:ER:HK:Stp1:Stp2,記為ERY6,即所述產赤蘚糖醇的基因工程菌。
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