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龍圖騰網獲悉韶關學院申請的專利一種植物源仿凋亡細胞外囊泡及其制備方法和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119258034B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202410983029.X，技術領域涉及：A61K9/50；該發明授權一種植物源仿凋亡細胞外囊泡及其制備方法和應用是由張光林;曾戎;陳潔;李翔;于白音設計研發完成，并于2024-07-22向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種植物源仿凋亡細胞外囊泡及其制備方法和應用在說明書摘要公布了：本發明屬于納米生物技術領域，公開了一種植物源仿凋亡細胞外囊泡及其制備方法和應用。該制備方法包括以下步驟：從植物組織提取出植物源外囊泡，并將植物源外囊泡與含凋亡信號磷脂酰絲氨酸PS溶液共融合，得到所述植物源仿凋亡細胞外囊泡。本發明的植物源仿凋亡細胞外囊泡，來源于天然植物，與哺乳動物細胞來源的凋亡細胞囊泡相比，具有良好的生物相容性，不易引起機體免疫排斥反應；經過磷脂酰絲氨酸PS修飾后，與天然的植物源外囊泡相比，本發明的植物源仿凋亡細胞外囊泡，其巨噬細胞靶向性、抑制巨噬細胞炎癥反應和改善RA的效果得到了顯著提升。

本發明授權一種植物源仿凋亡細胞外囊泡及其制備方法和應用在權利要求書中公布了：1.一種植物源仿凋亡細胞外囊泡的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： 將5g鐵皮石斛莖段用無菌水或去離子水反復清洗去除表面灰塵和微生物；將清洗后的鐵皮石斛莖段自然晾干；將晾干后的鐵皮石斛莖段與25mL磷酸鹽緩沖溶液pH7.0混合處理，孵育12h；加入濃度為1mgg莖段的果膠蛋白酶和濃度為2mgg莖段的纖維素酶進行酶解，酶解時間12h，溫度24℃；收集全部酶解后的汁液，先以3000g離心30min；收集上清液，再以10000g離心1.5h后取上清液；使用超高速離心機將該上清液離心2.5h，轉速為150000g；超高速離心后取沉淀部分；采用蔗糖梯度離心法再用超高速離心機以150000g離心1.5h，蔗糖溶液為8％gv、30％gv、45％gv和60％gv；選擇在30-45％的一層提取純化的鐵皮石斛外囊泡，吸取4mL；加入5倍體積的PBS，用超濾管將蔗糖去除換成PBS；通過上述步驟，即可得到高純度的鐵皮石斛外囊泡DONVs； 將1μmol的二油酰基磷脂酰絲氨酸DOPS、7μmol的磷脂酰膽堿和2μmol的膽固醇混合溶解在10mL有機溶劑中；所述有機溶劑為氯仿和乙醇，體積比為氯仿：乙醇＝9:1，震蕩混合均勻；經旋轉蒸發儀40℃，20min蒸干有機溶劑，得到脂質薄膜；用1mLPBS溶液將脂質薄膜水化，得到PS脂質體渾濁液；使用探頭超聲儀超聲1min，150W，直至溶液清澈透明；通過擠出儀使PS脂質體的粒徑均一化，保持在200nm左右； 將PS脂質體PSLs與DONVs懸浮液按數量比3:1比例混合，在37℃下孵育60分鐘，孵育過程機械攪拌來促進PSLs與DONVs的融合；將共融合后的混合物通過擠出儀使粒徑均一化，保持在200nm左右，即為P-ApoVs1； 或， 將5g甘木通葉片用無菌水或去離子水反復清洗去除表面灰塵和微生物；將清洗后的甘木通葉片自然晾干；將晾干后的甘木通葉片與25mL磷酸鹽緩沖溶液pH7.0混合處理，孵育12h；加入濃度為1mgg甘木通葉片的果膠蛋白酶和濃度為2mgg甘木通葉片的纖維素酶進行酶解，酶解時間12h，溫度24℃；收集全部酶解后的汁液，先以3000g離心30min；收集上清液，再以10000g離心1.5h后取上清液；使用超高速離心機將該上清液離心2.5h，轉速為150000g；超高速離心后取沉淀部分；采用蔗糖梯度離心法再用超高速離心機以150000g離心1.5h，蔗糖溶液為8％gv、30％gv、45％gv和60％gv；選擇在30-45％的一層提取純化的甘木通外囊泡，吸取4mL；加入5倍體積的PBS，用超濾管將蔗糖去除換成PBS；通過上述步驟，即可得到高純度的甘木通外囊泡CFNVs； 將1μmol的二油酰基磷脂酰絲氨酸DOPS、7μmol的磷脂酰膽堿和2μmol的膽固醇混合溶解在10mL有機溶劑中；所述有機溶劑為氯仿和乙醇，體積比為氯仿：乙醇＝9:1，震蕩混合均勻；經旋轉蒸發儀40℃，20min蒸干有機溶劑，得到脂質薄膜；用1mLPBS溶液將脂質薄膜水化，得到PS脂質體渾濁液；使用探頭超聲儀超聲1min，150W，直至溶液清澈透明；通過擠出儀使PS脂質體的粒徑均一化，保持在200nm左右； 將PS脂質體PSLs與DONVs懸浮液按數量比3:1比例混合，在37℃下孵育60分鐘，孵育過程機械攪拌來促進PSLs與DONVs的融合；將共融合后的混合物通過擠出儀使粒徑均一化，保持在200nm左右，即為P-ApoVs2。

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