昆明理工大學向誠獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉昆明理工大學申請的專利一種納米酶凝膠比色-熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119269427B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-02發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202411754991.2,技術領域涉及:G01N21/31;該發明授權一種納米酶凝膠比色-熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法是由向誠;楊德志;楊亞玲;李秋蘭設計研發完成,并于2024-12-03向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種納米酶凝膠比色-熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種納米酶凝膠比色?熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法,本發明中以合成的鐵、銅摻雜碳點納米材料CS@Fe,CuCDs為還原劑還原KMnO4形成CS@Fe,CuCDs?MnO2納米酶,CS@Fe,CuCDs?MnO2表現出獨特的熒光及類過氧化物酶特性,熒光量子產率達76%;然后將CS@Fe,CuCDs?MnO2納米酶與瓊脂糖溶液、3,3’?二氨基聯苯胺四鹽酸鹽溶液混合,滴加到細胞培養孔板中,冷卻制得納米酶水凝膠微孔板;將納米酶水凝膠微孔板應用在比色?熒光雙模式檢測細菌內毒素中,構建了一種納米酶凝膠基熒光和比色雙模式生物傳感器;本發明方法具有靈敏度高、特異性強、操作簡單、快速等特點。
本發明授權一種納米酶凝膠比色-熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法在權利要求書中公布了:1.一種納米酶凝膠比色-熒光雙模式檢測細菌內毒素的方法,其特征在于,步驟如下: (1)將0.3-0.5g殼聚糖、0.3-0.5g檸檬酸、0.15-0.35gCuCl2·2H2O、0.18-0.4gFeCl3·6H2O、0.15-0.35g鄰苯二胺溶解于30-50mL體積濃度0.05-0.1%的醋酸溶液中,超聲處理后,將混合液置于微波、170-190℃下反應1-2h后,自然冷卻至室溫,用0.22μm濾膜除去大顆粒雜質,再經高速離心,收集上清液,真空干燥制得鐵、銅摻雜碳點納米材料CS@Fe,CuCDs; (2)將高錳酸鉀溶解于CS@Fe,CuCDs溶液中,室溫攪拌混勻后,高速離心,收集上清液,真空干燥制得CS@Fe,CuCDs-MnO2納米酶; (3)將瓊脂糖溶于去離子水20mL中,加熱至完全溶解后,加入CS@Fe,CuCDs-MnO2納米酶溶液100-500μL和3,3’-二氨基聯苯胺四鹽酸鹽溶液100-500μL,混勻后,將混合液快速滴加到細胞培養孔板中,冷卻至室溫,制得納米酶水凝膠微孔板; (4)將不同濃度的細菌內毒素和H2O2滴入納米酶水凝膠微孔板中,在30℃下孵育10-15min后,在自然光或熒光條件下拍照采集圖片,利用圖像處理軟件讀取拍攝圖像的RGB值,將其轉化為灰度值,確定灰度值與細菌內毒素濃度的線性關系; (5)將待測樣品和H2O2滴入納米酶水凝膠微孔板中,在30℃下孵育10-15min后,在自然光或熒光條件下拍照采集圖片,利用圖像處理軟件讀取拍攝圖像的RGB值,根據RGB值獲得待測樣品中細菌內毒素含量。
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