上海理工大學艾連中獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉上海理工大學申請的專利一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具及其應用方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116004689B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211013044.9,技術領域涉及:C12N15/74;該發明授權一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具及其應用方法是由艾連中;宋馨;熊智強;夏永軍;王光強設計研發完成,并于2022-08-23向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具及其應用方法在說明書摘要公布了:本發明涉及一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具及其應用方法,基因編輯工具含有兩個sgRNA的基因編輯質粒,其中每個質粒包括用于編輯目的基因的sgRNA1和誘導表達靶向質粒中抗性基因、用于消除質粒的sgRNA2,在實施基因編輯過程中,由編輯目的基因的sgRNA1實現基因敲除,編輯完畢后,加入誘導劑以啟動靶向質粒中抗性基因的sgRNA2的表達,從而實現基因編輯質粒消除。與現有技術相比,本發明通過采用CRISPR系統,能夠有效消除雙歧桿菌中的抗性質粒,通過Cas9蛋白對抗性基因的切割造成質粒雙鏈斷裂,最終可獲得抗性質粒完全消除的穩定菌株,具有簡單有效,設備要求與成本較低,質粒清除率高等特點。
本發明授權一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具及其應用方法在權利要求書中公布了:1.一種清除雙歧桿菌抗性質粒的基因編輯工具,其特征在于,所述的基因編輯工具為一個含有兩種sgRNA的基因編輯質粒,其中兩種sgRNA分別為sgRNA1和sgRNA2, 所述的sgRNA1的啟動子為人工合成強啟動子P23,P23的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,用于編輯目的基因; 所述的sgRNA2的啟動子為PlacZ,PlacZ的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示,用于誘導表達靶向質粒中抗性基因的sgRNA2,消除質粒。
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