合肥工業大學張華獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉合肥工業大學申請的專利一種促進番茄果實成熟的基因SlCAS1及其調控方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115466743B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211135305.4,技術領域涉及:C12N15/29;該發明授權一種促進番茄果實成熟的基因SlCAS1及其調控方法是由張華;孫忱;姚改芳;胡康棣;孫紅葉;顏龍飛;肖鈺薇設計研發完成,并于2022-09-19向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種促進番茄果實成熟的基因SlCAS1及其調控方法在說明書摘要公布了:一種促進番茄果實成熟的基因SlCAS1及其調控方法,所述基因的核苷酸序列如SeqNo.1所示。本發明通過從番茄中得到SlCAS1基因完整的編碼序列,設計靶點,將靶點連接到載體CRIPSR?Cas9上,利用農桿菌侵染法轉化植物,獲得基因編輯植株,對基因編輯植株進行了分析。
本發明授權一種促進番茄果實成熟的基因SlCAS1及其調控方法在權利要求書中公布了:1.一種促進番茄果實成熟的調控方法,其特征在于:包括下列步驟: 步驟1:以番茄cDNA為模板,以第一輪正向引物-F1、第一輪反向引物-R1為引物對進行第一輪PCR擴增,獲得第一輪PCR擴增產物;再以第一輪PCR擴增產物為模板,以第二輪正向引物-F2、第二輪反向引物-R2為引物對進行第二輪PCR擴增,并使用普通DNA純化試劑盒進行純化回收獲得第二輪PCR擴增產物,即為目的基因片段;其中,引物序列如下: 第一輪正向引物-F1:5’-AGAGATAGACATTTACAGGCTTCA-3’; 第一輪反向引物-R1:5’-TTGAACACTAATCAACTGATACAGG-3’; 第二輪正向引物-F2:5’-CGCGGATCCATAAATTTCATCAATGGCGTCGTTG-3’; 第二輪反向引物-R2:5’-CCGCTCGAGATCAACTGATACAGGTTGCATGTTT-3’; 步驟2:用限制性內切酶BamHI和限制性內切酶XhoI分別對載體pBI121和目的基因片段進行雙酶切,酶切產物純化后,得到線性pBI121載體和酶切后目的基因片段; 步驟3:酶切后目的基因片段和線性pBI121載體進行重組,得到CAS1-pBI121質粒; 步驟4:將CAS1-pBI121質粒轉化EHA105農桿菌感受態細胞; 步驟5:含有CAS1-pBI121質粒的EHA105農桿菌侵染番茄子葉并獲得轉基因陽性苗SlCAS1-OE。
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