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龍圖騰網(wǎng)獲悉河南潤(rùn)盾生物科技有限公司;海南中鍵投資有限公司申請(qǐng)的專(zhuān)利一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116286635B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-26發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào)為：202310331437.2，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N5/0783；該發(fā)明授權(quán)一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法是由齊國(guó)光;湛振鍵;李妖繞;劉林;彭大為;蔡秋雨;鄭世鑫;姜莉;李俊;齊航;劉世豪;董文娟;吳翔;沈佳;王瑞設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2023-03-30向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專(zhuān)利申請(qǐng)。

本一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明提出了一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法，包括在體外培養(yǎng)的第2～3d時(shí)，在培養(yǎng)基中加入海參多糖提取物，在體外培養(yǎng)的第4～5d時(shí)，更換培養(yǎng)基，同時(shí)加入海參多糖提取物，本發(fā)明獲得的γδT細(xì)胞對(duì)淋巴瘤Daudi細(xì)胞的殺傷活性高，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，殺傷活性有不同程度的提高，γδT細(xì)胞具有高活性。本發(fā)明對(duì)γδT細(xì)胞的擴(kuò)增效率高，有利于快速獲得高活性的γδT細(xì)胞，操作簡(jiǎn)單、便捷。

本發(fā)明授權(quán)一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.一種高活性的γδT細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法，其特征在于，包括在體外培養(yǎng)的第2~3d時(shí)，在培養(yǎng)基中加入海參多糖提取物，在體外培養(yǎng)的第4~5d時(shí)，更換培養(yǎng)基，同時(shí)加入海參多糖提取物； 在體外培養(yǎng)的第2~3d時(shí)，海參多糖提取物的添加量為30~40μgmL，在體外培養(yǎng)的第4~5d時(shí)，海參多糖提取物的添加量為20~30μgmL； 更換培養(yǎng)基時(shí)，調(diào)節(jié)細(xì)胞密度至（4~5）×105個(gè)mL； 在體外培養(yǎng)的第2~3d時(shí)，調(diào)節(jié)O2體積濃度為75~80%，余下為CO2，在體外培養(yǎng)的第4~5d時(shí)，調(diào)節(jié)O2體積濃度為85~90%，余下為CO2； 所述海參多糖提取物的制備方法，包括在海參粉中加入乙醇混合，超聲提取，靜置，棄去上清液，取沉淀1，加入Sevag試劑萃取，收集上清液，醇沉，棄去上清液，離心，取沉淀2，冷凍干燥，加水溶解，經(jīng)HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱，收集洗脫液，濃縮，透析，冷凍干燥，得海參多糖提取物； 海參粉和乙醇的料液質(zhì)量體積比1：20-25mL；Sevag試劑為體積比為4：1的氯仿和正丁醇；經(jīng)HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱，分別采用0.4M、0.6M、0.8M的NaCl溶液洗脫。

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