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龍圖騰網獲悉上海思路迪生物醫學科技有限公司申請的專利一種RT-qPCR定量的內參及其制備方法和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN117448449B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202210878275.X，技術領域涉及：C12Q1/6886；該發明授權一種RT-qPCR定量的內參及其制備方法和應用是由陳升;張大東;許曉雅;李志寬;年寶寧設計研發完成，并于2022-07-25向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種RT-qPCR定量的內參及其制備方法和應用在說明書摘要公布了：本發明提出了一種RT?qPCR定量的內參及其制備方法和應用，屬于基因工程技術領域。所述內參選自miR?423?3p、miR?128?3p、miR?30d?5p、miR?339?3p、miR?625?3p、miR?140?3p、let?7g?5p、miR?148b?3p、miR?191?5p和miR?24?3p中的至少一種。本發明采用smallRNAsequencing技術對胰腺炎和胰腺癌患者血漿小胞外囊泡miRNA表達進行定量，篩選不同個體之間的表達最為穩定的miRNA作為候選內參；采用smallRNAsequencing技術在另一獨立的胰腺炎和胰腺癌患者群體對篩選出的候選內參進行穩定性驗證。

本發明授權一種RT-qPCR定量的內參及其制備方法和應用在權利要求書中公布了：1.一種RT-qPCR定量的內參的制備方法，其特征在于，該RT-qPCR定量的內參用于在慢性胰腺炎和胰腺癌的RT-qPCR定量中的應用；該方法包括以下步驟： S1.血漿小胞外囊泡的提取；其中，所述血漿小胞外囊泡的來源樣本是慢性胰腺炎和胰腺癌患者的血漿樣本； S2.血漿小胞外囊泡miRNA的抽提及表達檢測； S3.對抽提得到的miRNA依次進行測序比對、注釋、過濾、表達量標準化處理，得到標準化后的miRNA的表達量； S4：依據篩選標準對miRNA進行篩選，篩選出穩定的miRNA，作為待驗證的候選內參；其中，所述篩選標準為： 在慢性胰腺炎和胰腺癌患者中表達水平都較高，標準化后表達量大于8； 2）變異系數小且表達穩定； S5.對待驗證的候選內參進行穩定性驗證，擇優確定最終內參； 其中，所述待驗證的候選內參包括miR-423-3p、miR-128-3p、miR-30d-5p、miR-339-3p、miR-625-3p、miR-140-3p、let-7g-5p、miR-148b-3p、miR-191-5p和miR-24-3p； 所述最終內參為miR-423-3p，所述miR-423-3p的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示； 其中，步驟S4具體包括： S41：剔除標準化后表達量小于8的miRNA； S42：計算剩余的每個miRNA的變異系數，并將變異系數按照從小到大進行排序； S43：選取變異系數排序處于前N個的miRNA，將選取的miRNA的表達量進行穩定性分析； S44：選取綜合穩定性靠前的前M個miRNA作為待驗證的候選內參； 其中，所述N與M為自然數，且N大于M。

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