江蘇省農業科學院薛文韜獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉江蘇省農業科學院申請的專利一種基于無性繁殖的牧草耐鹽性鑒定的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN117882573B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410156731.9,技術領域涉及:A01G2/10;該發明授權一種基于無性繁殖的牧草耐鹽性鑒定的方法是由薛文韜;劉智微;鐘小仙設計研發完成,并于2024-02-04向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于無性繁殖的牧草耐鹽性鑒定的方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種基于無性繁殖的牧草耐鹽性鑒定的方法,以穴盤為裝置、泥炭土為介質、底盒為營養液及鹽溶液承載體的操作體系,不僅成本低廉、操作簡便,還可輕松將介質?溶液分離,極利于底盒內營養液及鹽溶液更換,可在長周期內維持介質中鹽脅迫力和營養成分的穩定;本發明以種莖的選取位置和扦插后的處理方法為兩個控制扦插后生長一致性的主要實驗參數,顯著提高了種莖無性繁殖后生長速率及生育期的一致性;通過開發的ALN計數法,分類清晰、統計簡便、數據重復性好且與離子含量等多個耐鹽性狀相關性高,極大的提高了耐鹽測定效率,同時鹽脅迫下不同物種間的ALN極值范圍相近且具可比性,是跨物種耐鹽性比較最佳的通用型“天線性狀”。
本發明授權一種基于無性繁殖的牧草耐鹽性鑒定的方法在權利要求書中公布了:1.一種基于無性繁殖的牧草種質資源耐鹽性鑒定的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟: 1育苗穴盤及牧草種莖扦插:以帶有底盒、育苗盤的育苗穴盤為裝置,將育苗盤每穴孔內部兩側開縫后,裝滿拌有等重營養液的泥炭基質,浸入放有4倍重營養液的底盒內吸漲2-5h;選取帶有頂葉的牧草種莖,以介于頂端生長點和第一莖節之間為起點向下截取6-10cm,作為無性繁殖的扦插材料;以每穴1-9根的種莖密度、地上部保留2-5cm的深度將牧草扦插在穴盤基質內,連同底盒將育苗穴盤轉入4-10℃內避光存放6-10天后,轉入光照培養; 2添加鹽脅迫及鹽溶液更換:待扦插苗培養生長至1葉展時期,向底盒溶液內直接添加相應鹽濃度的氯化鈉溶質,水平搖床低速振蕩均勻后繼續光照培養直至實驗終止,期間每隔4天更換一次鹽溶液;更換溶液前,先對每個育苗穴盤補水直至初始重量,吸漲2-5h后倒空底盒內所有溶液,再用含有相應鹽濃度的營養液補充入底盒至初始重量,搖晃均勻后即完成鹽溶液更換;在加鹽后20-30天終止光照培養進行平均葉片數的耐鹽性狀統計; 3牧草耐鹽曲線擬合及參數計算:以0、100、200、300、400、500mM的6個氯化鈉脅迫處理后的耐鹽性狀為數據組,用數學模型Sigmoid三參數進行擬合,獲得y0、a、和b值;其中a為y變量的最大值,b為擬合曲線的陡度,x0代表擬合曲線最大半激活水平;先利用公式求導Ymax值,利用反函數計算當Ymax下降一半時擬合曲線上對應的X值,并定義為Salt50,即牧草在鹽脅迫下的半生存濃度; 所述步驟1中,種莖的選取位置為:以介于頂端生長點和第一莖節之間為起點向下截取6-7cm; 所述步驟2中,平均葉片數計數法具體為:以扦插后種莖生長出的葉片形態進行計數,頂端切口長出葉鞘記為0.2,葉鞘伸出心葉尖記為0.5,第一心葉半展記為0.8,第一心葉全展成真葉記為1.0;第二心葉半展記為1.5,第二心葉全展為真葉記為2.0;以此類推。
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