黃淮學院戚俊峰獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉黃淮學院申請的專利一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體、制備方法及其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN118791600B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410920780.5,技術領域涉及:C07K16/12;該發明授權一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體、制備方法及其應用是由戚俊峰;謝麗霞;胡嬋娟;吳志豪;劉楠;夏治強;劉軍和設計研發完成,并于2024-07-10向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體、制備方法及其應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體、制備方法及其應用,雙識別人工抗體表面含有與目標細菌形狀、大小相匹配的印跡孔穴,且印跡孔穴內含有能夠識別肽聚糖的糖肽類抗生素。其制備方法具體為,首先將糖肽類抗生素修飾在基體材料表面,然后依次加入金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,SA)與功能單體,隨后進行聚合反應;反應完成后將SA從聚合產物上移除,即可獲得SA雙識別人工抗體。本發明制備的人工抗體能夠對SA的形態和細胞壁肽聚糖進行雙重識別,具有親和力高、特異性強的特點,可用于食品及生物樣本中痕量SA的高效吸附分離。
本發明授權一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體、制備方法及其應用在權利要求書中公布了:1.一種金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體的制備方法,其特征在于,所述人工抗體由基底材料、糖肽類抗生素與印跡聚合物構成,所述印跡聚合物表面含有與目標細菌形狀、大小相匹配的印跡孔穴,印跡孔穴內含有糖肽類抗生素,糖肽類抗生素通過分子間隔臂與基底材料相連;所述基底材料為聚苯乙烯孔板,所述的糖肽類抗生素為萬古霉素、去甲萬古霉素中的任意一種或兩種任意比例的混合物,所述分子間隔臂為末端帶有胺基的聚乙二醇5000(H2N-PEG5000-NH2)或聚乙烯亞胺(PEI),所述制備方法包含以下步驟: (1)向孔板內每孔加入多巴胺鹽酸鹽溶液,暴露于空氣中聚合20h~25h,對孔板表面進行修飾; (2)用無菌純水洗滌孔板,加入分子間隔臂溶液,繼續反應15h~20h; (3)將糖肽類抗生素、EDC和NHS依次溶于MES緩沖溶液中,將混合液加入到修飾有分子間隔臂的孔板中孵育5h~8h,反應完畢后用無菌純水洗滌孔板; (4)向孔板內加入濃度為108~5×108cfumL金黃色葡萄球菌菌液,繼續孵育1h~3h;之后用無菌純水洗去多余的金黃色葡萄球菌; (5)向孔板內加入多巴胺鹽酸鹽溶液,暴露于空氣中進行聚合反應18h~36h;其中,多巴胺鹽酸鹽溶液的濃度為3.0mgmL; (6)用模板洗液洗脫以移除金黃色葡萄球菌,隨后用無菌純水洗滌,即得到金黃色葡萄球菌雙識別人工抗體; 步驟(1)中和步驟(5)多巴胺鹽酸鹽溶液是將多巴胺溶于pH=8.5的Tris-HCl中,步驟(1)中多巴胺鹽酸鹽濃度為1.5~12mgmL,步驟(1)中多巴胺鹽酸鹽溶液、步驟(3)中混合液、步驟(4)中金黃色葡萄球菌菌液和步驟(5)中多巴胺鹽酸鹽溶液的體積比為1:1:1:1。
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