江南大學周景文獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉江南大學申請的專利一種生產咖啡酸的重組大腸桿菌及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115948312B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211345561.6,技術領域涉及:C12N1/21;該發明授權一種生產咖啡酸的重組大腸桿菌及應用是由周景文;王煉;曾偉主;余世琴;陳堅設計研發完成,并于2022-10-31向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種生產咖啡酸的重組大腸桿菌及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種生產咖啡酸的重組大腸桿菌及應用,屬于基因工程和生物工程技術領域。本發明在大腸桿菌中異源表達約氏黃桿菌的酪氨酸解氨酶FjTAL和大腸桿菌BL21DE3內源的hpaBC,實現了咖啡酸的合成;并通過過量表達來源于皮狀絲孢酵母的酪氨酸解氨酶TcTAL,減少了咖啡酸合成的中間產物的積累;通過敲除咖啡酸合成前體物酪氨酸合成的競爭途徑,強化輔因子的合成和過表達多酚轉運蛋白,使咖啡酸的產量得到明顯提高。本發明構建的工程菌株咖啡酸的產量可達775.7mgL,為工業化生產咖啡酸及其衍生物提供了一種新的方法。
本發明授權一種生產咖啡酸的重組大腸桿菌及應用在權利要求書中公布了:1.一種合成咖啡酸的重組大腸桿菌,其特征在于,對大腸桿菌出發菌株進行了如下改進: 1表達來源于約氏黃桿菌Flavobacteriumjohnsoniae的酪氨酸解氨酶FjTAL和大腸桿菌BL21DE3內源的4-羥基苯乙酸-3-單加氧酶hpaBC; 2表達來源于皮狀絲孢酵母Trichosporoncutaneum的酪氨酸解氨酶TcTAL; 3過表達大腸桿菌來源的FAD合成酶和運動發酵單胞菌Zymomonas.mobilis來源的分支酸變位酶; 4表達來源于大腸桿菌的3-脫氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合成酶突變體;編碼所述3-脫氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合成酶突變體的基因aroGfbr的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示; 5過表達大腸桿菌來源的外排蛋白;所述來源于約氏黃桿菌的酪氨酸解氨酶FjTAL的氨基酸序列如Genbank登錄號:WP_012023194.1所示;所述4-羥基苯乙酸-3-單加氧酶hpaBC的編碼基因如SEQIDNO.2所示;編碼所述來源于皮狀絲孢酵母的酪氨酸解氨酶TcTAL的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示;編碼所述FAD合成酶的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示;所述分支酸變位酶的氨基酸序列如Genbank登錄號:AAA27684.1所示;所述外排蛋白的氨基酸序列如Genbank登錄號:ARH97076.1所示。
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