大連海洋大學黎睿君獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉大連海洋大學申請的專利用于表達黃斑藍子魚L-氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN107893084B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-19發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:201711365705.3,技術領域涉及:C12N15/53;該發明授權用于表達黃斑藍子魚L-氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法是由黎睿君;侯玉林;韓笑設計研發完成,并于2017-12-18向國家知識產權局提交的專利申請。
本用于表達黃斑藍子魚L-氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法在說明書摘要公布了:本發明公開一種用于表達黃斑藍子魚L?氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法,將DNA序列如SEQIDNO:1所示的基因克隆至載體pMD18?T,構建重組質粒;用限制性內切酶EcoRⅠ和XhoⅠ分別酶切重組質粒和供體質粒,連接酶切產物以獲得重組供體質粒;將重組供體質粒轉化至大腸桿菌,使目的基因與大腸桿菌內所含桿狀病毒穿梭載體特異性轉座,篩選并抽提出重組桿粒;利用脂質體轉染方法使重組桿粒轉染昆蟲細胞,待昆蟲細胞病變后收獲重組桿狀病毒。
本發明授權用于表達黃斑藍子魚L-氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法在權利要求書中公布了:1.一種用于表達黃斑藍子魚L-氨基酸氧化酶的重組桿狀病毒構建方法,其特征在于按照如下步驟進行: a.將DNA序列如SEQIDNO:1所示的基因optiSR-LAAO擴增后克隆至載體pMD18-T,構建重組質粒pMD-optiSR-LAAO; b.用限制性內切酶EcoRI和XhoI分別酶切重組質粒pMD-optiSR-LAAO和質粒pFastBacHTA,連接酶切產物,篩選并抽提出重組供體質粒pFastBac-optiSR-LAAO; c.將重組供體質粒pFastBac-optiSR-LAAO轉化至大腸桿菌DH10Bac,使目的基因optiSR-LAAO與DH10Bac內所含桿狀病毒穿梭載體特異性轉座,篩選并抽提出重組桿粒Bacmid-optiSR-LAAO; d.利用脂質體轉染方法使重組桿粒Bacmid-optiSR-LAAO轉染Sf9昆蟲細胞,待Sf9昆蟲細胞病變后收獲重組桿狀病毒r-Bac-optiSR-LAAO; 步驟a中,所述擴增的引物如SEQIDNO:2-SEQIDNO:9所示; 步驟b中,供體質粒pFastBacHTA轉化至大腸桿菌感受態細胞DH10Bac中并抽提,獲得所述質粒pFastBacHTA; 其中,SEQIDNO:1所示基因optiSR-LAAO,是根據黃斑藍子魚SR-LAAO基因序列HQ540313.1,合成切除信號肽的黃斑藍子魚SR-LAAO基因,對黃斑藍子魚SR-LAAO基因密碼子進行優化設計,合成得到優化后的基因。
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