山東中醫藥大學張永清獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉山東中醫藥大學申請的專利基于Real-time PCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115247219B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-12發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202111582499.8,技術領域涉及:C12Q1/6895;該發明授權基于Real-time PCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病是由張永清;張全芳;朱桐杉;陳雪燕;劉國霞;胡悅;范陽陽;譚晴晴;劉艷艷;楊雪;姚川;步迅設計研發完成,并于2021-12-22向國家知識產權局提交的專利申請。
本基于Real-time PCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病在說明書摘要公布了:本發明公開了基于Real?timePCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病的方法,該方法通過對金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病三種病原菌檢測,選擇ITS基因作為靶向基因,設計引物和TaqMan熒光探針,熒光PCR擴增,快速準確鑒別金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌。用于快速準確鑒別金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌,為金銀花三種病害的防治奠定病原學基礎,對保證金銀花質量及產量穩定增長具有重要的意義。
本發明授權基于Real-time PCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病在權利要求書中公布了:1.一種基于Real-timePCR同時鑒定金銀花炭疽病、白粉病、褐斑病的方法,其特征在于,包括如下步驟: 1從待測樣品中提取DNA作為模板,選擇靶基因; 2利用金銀花炭疽病、白粉病、褐斑病病原菌引物和探針組合作為PCR擴增引物,進行PCR擴增; 3設立陽性對照、陰性對照及空白對照,分析實驗結果,給出第n個循環時的熒光增加值ΔRn與擴增曲線Ct值,根據探針熒光信號及擴增曲線Ct值來判定是否檢出金銀花炭疽病、白粉病、褐斑病; 步驟2中所述的金銀花炭疽病病原菌引物的核苷酸序列如下所示: Colletotrichum_gloeosporioidesF:AGTTTACGCTCTATAACCCTTTG; Colletotrichum_gloeosporioidesR:TTATTTGCTTGTACCACTCAGAA; 步驟2中所述的金銀花白粉病病原菌引物的核苷酸序列如下所示: Erysiphe_loniceraeF:CGATTTGTATCTTGTTGCTTTG; Erysiphe_loniceraeR:AACATGAGTTTTTGGTTAGGTCT; 步驟2中所述的金銀花褐斑病病原菌引物的核苷酸序列如下所示: Cercospora_sp-F:GAATCTTTGAACGCACATTG; Cercospora_sp-R:ATGAAATCACAACGCTTAGAGA; 步驟2中所述的金銀花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌的探針的核苷酸序列如下所示: Colletotrichum_gloeosporioidesP:5'ROX–TAACTGTTGCTTCGGCGGGTAGG-BHQ23'; Erysiphe_loniceraeP:5'JOE–ATGTCGTCGAGCTCCGCAAG-BHQ23'; Cercospora-P:5'FAM–TCATTTCACCACTCAAGCCTCG-BHQ23'。
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