同濟大學王林獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉同濟大學申請的專利一種胞外聚合物對紫外/過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制評價方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN120310890B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-09-09發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202510789108.1,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C12Q1/6869;該發(fā)明授權(quán)一種胞外聚合物對紫外/過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制評價方法是由王林;丁義哲;孫啟雅;彭諾;李詠梅;平倩設(shè)計研發(fā)完成,并于2025-06-13向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本一種胞外聚合物對紫外/過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制評價方法在說明書摘要公布了:本發(fā)明涉及一種針對胞外聚合物對紫外過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制的評價方法,屬于污水處理技術(shù)領(lǐng)域。包括以下步驟:對污水處理廠二級出水中的總胞外聚合物EPS進行提取,并設(shè)置不同實驗組和對照組;利用紫外和過氧乙酸對所得實驗組進行紫外過氧乙酸消毒實驗,得到待測污泥樣品;將所得對照組的待測污泥樣品和實驗組的待測污泥樣品進行抽濾,得到待測固體微生物樣本;將得到的待測固體微生物樣本進行多組學關(guān)聯(lián)分析。本發(fā)明適用于從不同角度評價胞外聚合物在紫外過氧乙酸消毒的壓力響應和抗性機制,過氧乙酸來源廣泛,價格低廉,用于污水處理,可有效降低成本;由于反應時間較短,工藝所采用的紫外線劑量低,建設(shè)費用和運行成本低。
本發(fā)明授權(quán)一種胞外聚合物對紫外/過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制評價方法在權(quán)利要求書中公布了:1.一種胞外聚合物對紫外過氧乙酸消毒的壓力響應及抗性機制評價方法,其特征在于,包括以下步驟: S1.對污水處理廠二級出水中的總胞外聚合物EPS進行提取,并設(shè)置不同實驗組和對照組; S2.利用紫外和過氧乙酸對步驟S1所得實驗組進行紫外過氧乙酸消毒實驗,得到待測污泥樣品; S3.將步驟S1所得對照組的待測污泥樣品和步驟S2所得實驗組的待測污泥樣品進行抽濾,得到待測固體微生物樣本; S4.將步驟S3得到的待測固體微生物樣本進行多組學關(guān)聯(lián)分析; 實驗組和對照組具體如下所示: EPS_0對照組即含EPS組:未提取EPS,在紫外過氧乙酸消毒前的樣品組; EPS_60實驗組即含EPS組:未提取EPS,在紫外過氧乙酸消毒60min后的樣品組; nEPS_0對照組即不含EPS組:提取EPS,在紫外過氧乙酸消毒前的樣品組; nEPS_60實驗組即不含EPS組:提取EPS,在紫外過氧乙酸消毒60min后的樣品組; 步驟S3中,所述多組學關(guān)聯(lián)分析包括宏基因組學分析、宏轉(zhuǎn)錄組學分析和非靶向代謝組學分析; 所述宏基因組學分析具體包括以下步驟: 將待測固體微生物樣本進行DNA提取,并檢測DNA濃度和純度,并篩選350bp的片段用于構(gòu)建文庫; 匹配文庫后進行基因組測序,隨后通過保留有效DNA數(shù)據(jù),并進行拼接組裝,對DNA基因序列進行聚類,從而構(gòu)建非冗余基因集; 將非冗余基因集分別與非冗余蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫NR和京都基因與基因組百科全書KEGG數(shù)據(jù)庫進行比對,并統(tǒng)計各物種的豐度; 所述宏轉(zhuǎn)錄組學分析包括以下步驟: 采用瓊脂糖凝膠電泳評估待測固體微生物樣本中的RNA降解程度,并對RNA純度進行測定,合格樣品進行RNA富集; 對富集后的RNA進行純化,并經(jīng)過末端修復后進行PCR擴增,獲得文庫; 文庫構(gòu)建完成后,使用Qubit2.0對末端修復完成的PCR進行初步定量,之后稀釋至1ngμL,隨后通過Agilent2100對插入片段大小進行檢測,符合預期后使用qPCR方法進行準確定量; 當PCR的有效濃度2nM時,文庫確定為質(zhì)檢合格,將質(zhì)檢合格的文庫測序后,得到原始數(shù)據(jù),將原始數(shù)據(jù)質(zhì)控后得到的有效數(shù)據(jù)比對現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)公開的宏轉(zhuǎn)錄組基因集,計算基因豐度,并結(jié)合物種功能注釋開展基因表達分析; 所述非靶向代謝組學的分析流程包含以下步驟: 將待測固體微生物樣本干燥后得到的固體樣本進行研磨,研磨后提取代謝產(chǎn)物,取等體積提取代謝產(chǎn)物樣本混合制備質(zhì)控樣本;采用超高效液相色譜-傅立葉變換質(zhì)譜進行代謝物檢測; 利用人類代謝組HMDB數(shù)據(jù)庫對質(zhì)譜信息進行比對和鑒定; 隨后利用R語言進行主成分分析篩選差異代謝物,并通過KEGG數(shù)據(jù)庫進行通路注釋,最后采用Python進行通路富集分析; 所述多組學關(guān)聯(lián)分析具體內(nèi)容包括:物種豐度、物種基因豐度以及氧化應激、DNA復制、物質(zhì)轉(zhuǎn)運、信號傳導、群體感應相關(guān)基因的表達、KEGG代謝通路分析、組間差異代謝通路;所述組間差異代謝通路包括次生代謝物生物合成、環(huán)境適應性代謝、雙組分信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)、輔助因子合成、碳代謝、氨基酸合成、群體感應QS、ABC轉(zhuǎn)運系統(tǒng)、嘌呤代謝、丙酮酸代謝及DNA復制。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人同濟大學,其通訊地址為:200092 上海市楊浦區(qū)四平路1239號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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