青島科技大學王衛獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉青島科技大學申請的專利一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN113252620B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-05發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202010089344.X,技術領域涉及:G01N21/64;該發明授權一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法是由王衛;董傳誠;唐凱;羅細亮設計研發完成,并于2020-02-12向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法在說明書摘要公布了:Hg2+和Ag+是兩種具有嚴重毒性的、分布廣泛的環境污染物,即使在低濃度下也會對環境和人類構成嚴重威脅,造成嚴重的、永久的損害。世界衛生組織對飲用水的標準作出了嚴格的限定。因此,建立高效、靈敏的可同時檢測Hg2+和Ag+的分析方法對于環境監測、食品安全等領域至關重要。本發明提出了一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法,該方法采用基于核酸外切酶循環放大技術的納米膠囊?核酸生物分子復合物不但能夠實現對Hg2+和Ag+的同時檢測,而且在確保高特異性的前提下,檢測靈敏度均得到顯著提高,同時,還獲得了對Hg2+和Ag+更寬的線性檢測范圍。
本發明授權一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法在權利要求書中公布了:1.一種可同時檢測Hg2+和Ag+的方法,其特征在于包括以下步驟: ①將含有Hg2+和Ag+的溶液加入到由2種核酸生物識別分子、2種熒光信號分子和具有中空、多孔結構的納米金構建而成的納米膠囊-核酸生物分子復合物中,用MOPS緩沖溶液稀釋,加入剪切酶EXOⅢ,放入37oC搖床反應1-3h; ②磁分離,取上清液進行熒光檢測,分別給予相應波長的激發,檢測與Hg2+和Ag+相對應的兩種染料的熒光信號; 所述的2種核酸生物識別分子分別是特異性識別Hg2+的5’-TTTGTTTGTTGGAAAACCTTCTTTCTTA-3’和特異性識別Ag+的5’-ACCACCCACCAAGGAATTCCTCCCTCCT-3’; 所述的2種熒光信號分子分別是羅丹明B和熒光素Cy5; 所述的2種核酸生物識別分子是通過靜電作用被分別組裝到具有中空、多孔結構的納米金表面; 所述的納米膠囊-核酸生物分子復合物的制備方法如下: 1通過選擇不同種類及其數量的堿基,分別設計并合成2種核酸生物識別分子,確保其分別對且僅對目標金屬離子Hg2+或Ag+具有特異性的響應,而對其它任何共存離子和干擾離子沒有響應; 2將磁珠用pH=7.0的MOPS緩沖溶液清洗后與具有中空、多孔結構的納米金溶液混合,加入聚二烯丙基二甲基氯化銨溶液,10-12h后磁分離,用pH=7.0的MOPS緩沖溶液清洗; 3加入熒光分子羅丹明B溶液,10-12h后加入可識別Hg2+的核酸生物分子溶液,10-12h后磁分離,用pH=7.0的MOPS緩沖溶液清洗,備用; 其中,所述的可識別Hg2+的核酸生物分子的堿基序列為5’-TTTGTTTGTTGGAAAACCTTCTTTCTTA-3’,它和Hg2+的特異性結合產物能夠被核酸外切酶剪切,釋放出Hg2+; 4重復執行步驟(2)后加入熒光分子Cy5溶液,10-12h后加入可識別Ag+的核酸生物分子溶液,10-12h后磁分離,用pH=7.0的MOPS緩沖溶液清洗,備用; 其中,所述的可識別Ag+的核酸生物分子的堿基序列為5’-ACCACCCACCAAGGAATTCCTCCCTCCT-3’,它和Ag+的特異性結合產物能夠被核酸外切酶剪切,釋放出Ag+; (5)將第(3)步和第(4)步所得產物分別用pH=7.0的MOPS緩沖溶液稀釋后混合,磁分離,即可制得同時檢測Hg2+和Ag+的納米膠囊-核酸生物分子復合物。
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