溫州醫科大學方合志獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉溫州醫科大學申請的專利一種基于鄰位連接技術和雜交鏈式反應檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的探針組合及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120272591B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510773145.3,技術領域涉及:C12Q1/6883;該發明授權一種基于鄰位連接技術和雜交鏈式反應檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的探針組合及應用是由方合志;鐘聲;沈麗君;王婭設計研發完成,并于2025-06-11向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于鄰位連接技術和雜交鏈式反應檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的探針組合及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種基于鄰位連接技術和雜交鏈式反應檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的探針組合及應用,屬于探針檢測領域。通過確定兩個能夠反映超復合體結構完整性的臨近蛋白亞基作為基座,利用抗原抗體結合的原理,促使識別并結合基座的抗原抗體因為核酸標記引發鄰位連接反應(PLA),根據雜交鏈式反應(HCR)原理,實現檢測信號的級聯放大,并通過超復合體結構完整性判定氧化磷酸化系統活性,克服傳統檢測方法的不足和局限,實現對超復合體結構快捷、高靈敏的準確檢測。同時,還通過將細胞固定在96孔熒光板上,利用多功能酶標儀對線粒體超復合體結構完整性進行檢測,最終實現同時對多達96個樣本進行平行檢測,實現檢測的數字化和高通量。
本發明授權一種基于鄰位連接技術和雜交鏈式反應檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的探針組合及應用在權利要求書中公布了:1.一種基于鄰位連接技術檢測線粒體呼吸鏈超級復合體的PLA探針,其特征在于,所述線粒體呼吸鏈超級復合體為線粒體呼吸鏈超級復合體CI1CIII2CIV1;所述PLA探針包括鄰位探針和檢測探針,其中所述鄰位探針包括抗體核酸偶聯物I和抗體核酸偶聯物II,所述抗體核酸偶聯物I為核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的DNA1探針和線粒體呼吸鏈超級復合體抗體偶聯得到,所述抗體核酸偶聯物II為核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的DNA2探針和線粒體呼吸鏈超級復合體抗體偶聯得到; 所述檢測探針包括核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的DNA3探針和SEQIDNO.4所示的DNA4探針; 所述DNA3探針和DNA4探針中的一條探針帶有熒光基團,另一條探針帶有猝滅基團; 與所述DNA1探針偶聯的線粒體呼吸鏈超級復合體抗體為線粒體復合體I亞基NDUFB8抗體;與所述DNA2探針偶聯的線粒體呼吸鏈超級復合體抗體為復合體IV亞基MT-CO1抗體。
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