溫州醫科大學吳志剛獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉溫州醫科大學申請的專利溫郁金凝集素高純品、制備方法及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115304663B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202111579470.4,技術領域涉及:C07K14/42;該發明授權溫郁金凝集素高純品、制備方法及應用是由吳志剛;姜程曦;張麗萍;費璇;余佳興設計研發完成,并于2021-12-22向國家知識產權局提交的專利申請。
本溫郁金凝集素高純品、制備方法及應用在說明書摘要公布了:本發明提供溫郁金凝集素高純品的制備方法及應用,其特征在于具有以下步驟,①樣品處理:溫郁金根莖鮮品去皮、粉碎,Tris?HCl緩沖液低溫浸提;②粗品制備:固體硫酸銨沉淀,透析;③半成品制備:粗品使用纖維素陰離子交換色譜DEAE?52柱分離純化;④純品制備:半成品使用葡聚糖凝膠色譜SephadexG?75柱分離純化,得溫郁金高純品凝集素WLT。本發明制備的溫郁金純品凝集素分子量約為28KDa,屬甘露糖結合型的天然蛋白,具有廣譜抗腫瘤活性。因而,本發明制備的凝集素產品可作為抗腫瘤藥物研發的新藥源,有利于加速新穎性天然蛋白藥物的開發。
本發明授權溫郁金凝集素高純品、制備方法及應用在權利要求書中公布了:1.溫郁金凝集素高純品的制備方法,其特征在于:包括以下步驟: S1:樣品處理:將新鮮的溫郁金根莖洗凈、去皮、粉碎,加入Tris-HCl緩沖液,浸提12~16h,離心,收集上清液; S2:粗品制備:在步驟S1得到的上清液中加入固體硫酸銨并充分攪拌至飽和度為60~70%,靜置10~12h,離心,沉淀物Tirs-HCl緩沖液溶解,透析,冷凍干燥得溫郁金凝集素粗品; S3:半成品制備:將步驟S2得到的溫郁金凝集素粗品加入Tris-HCl緩沖液溶解,用DEAE-52纖維素陰離子交換柱分離純化,使用含0.2~1.0mollNaCl的Tris-HCl緩沖液梯度洗脫,合并收集具凝血活性的蛋白峰,冷凍干燥得溫郁金凝集素半成品; S4:高純品制備:將步驟S3得到的溫郁金凝集素半成品加入Tris-HCl緩沖液溶解,用葡聚糖凝膠SephadexG-75柱分離純化,使用含0.2~1.0mollNaCl的Tris-HCl緩沖液梯度洗脫并收集具凝血活性蛋白峰的試管液,合并,冷凍干燥得溫郁金凝集素高純品; 步驟S3中凝集素粗品和步驟S4中的半成品均使用重量體積為1:8~15的料液比的Tris-HCl緩沖液進行溶解; 步驟S3和S4中梯度洗脫過程中,包含采用紫外分光光度計實時監測流出液280nm處的吸光值的步驟,以此確定洗脫液的蛋白峰,直至流出液吸光值趨于正常值為止; 步驟S3和S4中梯度洗脫過程中,蠕動泵控制流速為0.5mlmin。
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