江蘇華諾泰生物醫藥科技有限公司王海龍獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉江蘇華諾泰生物醫藥科技有限公司申請的專利一種病毒循環批次培養裝置及培養方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN120173703B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-26發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510639776.6,技術領域涉及:C12M1/00;該發明授權一種病毒循環批次培養裝置及培養方法是由王海龍;劉公兵;齊舒雅;楊鵬;朱翔;趙斌;劉鵬;顧文龍;于一泓設計研發完成,并于2025-05-19向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種病毒循環批次培養裝置及培養方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種病毒循環批次培養裝置及培養方法,具體涉及病毒培養技術領域。所述裝置包括固定床反應器、循環罐、水浴夾層、片載床、上籃、下籃、液體分流器和水浴夾套;其中,循環罐外側設置有水浴夾套,以控制循環罐中的溫度;循環罐的液體進入固定床反應器進行反應;固定床反應器包括上部的上籃和下部的下籃,中間部分為片載床,用于培養病毒;固定床反應器外側設置有水浴夾層,用于控制固定床反應器中的溫度,培養后的病毒經液體分流器收集。本發明的固定床反應器,細胞承受的剪切力、應力小,培養基中不需要添加消泡劑等懸浮培養成份,不需要細胞截留即可實現灌流,且灌流流速上限高,對連續細胞友好,可以十幾倍或幾十倍的放大病毒生產。
本發明授權一種病毒循環批次培養裝置及培養方法在權利要求書中公布了:1.一種利用病毒循環批次培養裝置進行病毒循環批次培養方法,其特征在于,所述方法包括: 步驟一,反應器細胞接種 ①按7×106~8×106cellsg片狀載體的接種量準備細胞,細胞懸液體積=固定床反應器(1)的工作體積+循環罐(2)的最小體積,并將細胞重懸于新鮮培養基中,制備成細胞懸液; ②固定床反應器(1)中液體排出,將細胞懸液加入循環罐(2)后,培養,前3min,攪拌槳速調整為較高轉速,對細胞的分布進行混勻,隨后轉速調整為較低轉速,保持不低于6h,完成細胞吸附后,將攪拌轉速再次調整為較高轉速;培養結束后,開啟循環罐(2)和固定床反應器(1)之間的循環;將循環罐(2)中部分液體流入固定床反應器(1)中,待液體流入完畢后,控制流速加入新鮮營養物質,同時以同樣流速泵出細胞混懸液,維持細胞培養生物反應器穩定的同時,實現細胞的連續培養; 所述步驟一中,細胞培養中,較高轉速是100~150rpm,吸附時較低轉速為50-70rpm; 步驟二,病毒接種 ①以適合的MOI稀釋毒種,將病毒維持液加入到循環罐(2)中,前3min,攪拌槳速調整為較高轉速,對細胞的分布進行混勻,隨后轉速調整為較低轉速,保持不低于6h,完成病毒吸附后,將攪拌轉速再次調整為較高轉速;病毒維持液的體積和細胞接種時類似,病毒維持液體積=固定床反應器(1)的工作體積+循環罐(2)的最小體積;循環罐(2)中在病毒培養所需的溫度和pH下,吸附0.8-1.2h,不同的病毒調整相關參數; ②待反應至需要濃度后,加入生物緩沖劑,開啟循環罐(2)和固定床反應器(1)之間的循環,轉移部分病毒液至固定床反應器(1)中,繼續培養; 所述步驟二中,病毒培養中,較高轉速為220-300rpm,較低轉速為150~200rpm; 所述病毒循環批次培養裝置包括固定床反應器(1)、循環罐(2)、水浴夾層(3)、片載床(4)、上籃(5)、下籃(6)、液體分流器(7)和水浴夾套(9); 其中,循環罐(2)外側設置有水浴夾套(9),以控制循環罐(2)中的溫度;循環罐(2)的液體進入固定床反應器(1)進行反應;固定床反應器(1)包括上部的上籃(5)和下部的下籃(6),中間部分為片載床(4),固定床反應器(1)不設置攪拌裝置,用于培養病毒,片載床(4)的厚度為10-20cm;循環罐(2)中的細胞懸液由下籃(6)進入,培養后的病毒液體由上籃(5)流入液體分流器(7)收集;固定床反應器(1)外側設置有水浴夾層(3),用于控制固定床反應器(1)中的溫度,循環罐(2)中設置有攪拌槳。
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