海南大學(xué)三亞南繁研究院;海南大學(xué)三亞研究院王洪星獲國(guó)家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)獲悉海南大學(xué)三亞南繁研究院;海南大學(xué)三亞研究院申請(qǐng)的專利基于RPA-LFD技術(shù)的檳榔黃化相關(guān)病毒的檢測(cè)系統(tǒng)及方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號(hào)為:CN120192964B 。
龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-08-26發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為:202510669060.0,技術(shù)領(lǐng)域涉及:C12N15/11;該發(fā)明授權(quán)基于RPA-LFD技術(shù)的檳榔黃化相關(guān)病毒的檢測(cè)系統(tǒng)及方法是由王洪星;溫佳偉;李詩(shī)琪;曹先梅;黃惜設(shè)計(jì)研發(fā)完成,并于2025-05-23向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。
本基于RPA-LFD技術(shù)的檳榔黃化相關(guān)病毒的檢測(cè)系統(tǒng)及方法在說(shuō)明書摘要公布了:本發(fā)明涉及植物病毒檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種基于RPA?LFD技術(shù)的檳榔黃化相關(guān)病毒的檢測(cè)系統(tǒng)及方法。檢測(cè)檳榔黃化病毒APV1的引物組,其特征在于:包括特異性引物對(duì);特異性引物對(duì)中上游引物的核苷酸序列如序列表SEQIDNo.1所示,下游引物的核苷酸序列如序列表SEQIDNo.2所示;還包括探針;所述探針經(jīng)生物素或FAM熒光基團(tuán)標(biāo)記修飾;經(jīng)修飾后的探針核苷酸序列如序列表SEQIDNo.3所示。優(yōu)點(diǎn)在于:檢測(cè)方面具有較高的特異性和較低的檢測(cè)限,與檳榔壞死環(huán)斑病毒等其他病毒無(wú)交叉反應(yīng);該引物探針組合適用于RPA?LFD檢測(cè),擴(kuò)增反應(yīng)所需時(shí)間較短;反應(yīng)結(jié)果會(huì)表現(xiàn)在試紙條上,裸眼即可觀察。
本發(fā)明授權(quán)基于RPA-LFD技術(shù)的檳榔黃化相關(guān)病毒的檢測(cè)系統(tǒng)及方法在權(quán)利要求書中公布了:1.一種基于RPA-LFD技術(shù)快速檢測(cè)檳榔黃化病毒APV1的方法,采用一種快速檢測(cè)檳榔黃化病毒APV1的檢測(cè)系統(tǒng),其特征在于:具體包括如下步驟: S1.樣品粗提:取50~100mg檳榔葉片組織于研缽中,加入樣本緩釋液研磨獲得粗提液,從待測(cè)樣品中粗提病毒RNA; S2.等溫?cái)U(kuò)增:以步驟S1獲得的RNA為模板,加入包含特異性引物對(duì)和探針的RPA反應(yīng)體系,將離心管插入恒溫?cái)U(kuò)增裝置中的離心管管架,通過(guò)溫度調(diào)節(jié)按鈕調(diào)節(jié)溫度,在37~44℃進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng); 特異性引物對(duì)中上游引物的核苷酸序列如序列表SEQIDNo.1所示,下游引物的核苷酸序列如序列表SEQIDNo.2所示;經(jīng)修飾后的探針核苷酸序列如序列表SEQIDNo.3所示;所述下游引物的5'端修飾有Biotin基團(tuán); 所述反應(yīng)體系包括如下組分和用量: RPA反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間為10±2min;RPA反應(yīng)的反應(yīng)溫度為恒溫37~44℃; S3.層析檢測(cè):將擴(kuò)增產(chǎn)物用純水稀釋后滴加至試紙條加樣區(qū),10~15分鐘內(nèi)觀察顯色結(jié)果;其中,檢測(cè)結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)為: 當(dāng)試紙條質(zhì)控線顯色且檢測(cè)線無(wú)顯色時(shí),判定為APV1陰性; 當(dāng)試紙條質(zhì)控線和檢測(cè)線同時(shí)顯色時(shí),判定為APV1陽(yáng)性; 采用側(cè)向流動(dòng)免疫試紙條進(jìn)行檢測(cè)的溫度為室溫,時(shí)間為10±1min。
如需購(gòu)買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請(qǐng)人或?qū)@麢?quán)人海南大學(xué)三亞南繁研究院;海南大學(xué)三亞研究院,其通訊地址為:572024 海南省三亞市崖州區(qū)甘農(nóng)大道三亞南繁種業(yè)眾創(chuàng)中心;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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