江南大學張濤獲國家專利權
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龍圖騰網獲悉江南大學申請的專利一種高效合成乳糖的方法及其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116064346B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210980977.9,技術領域涉及:C12N1/21;該發明授權一種高效合成乳糖的方法及其應用是由張濤;李夢麗;駱葉姣;江波設計研發完成,并于2022-08-16向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種高效合成乳糖的方法及其應用在說明書摘要公布了:本發明涉及一種高效合成乳糖的方法及其應用,屬于代謝工程和食品發酵領域。本發明采用CRISPRCas9基因編輯技術對底盤微生物進行改造,通過重構葡萄糖轉運途徑、乳糖合成途徑、調控中心碳代謝、解除阻遏蛋白的阻遏抑制、模塊途徑優化等策略實現無抗和有抗菌株的構建。本發明得到的重組工程菌可以實現乳糖的生產,在并可利用甘油和葡萄糖實現高效合成乳糖,產物生產水平高,具有較強的社會經濟效益,市場開發前景廣闊。
本發明授權一種高效合成乳糖的方法及其應用在權利要求書中公布了:1.一種基因工程菌,其特征在于,所述工程菌以敲除了β-半乳糖苷酶基因lacZ、UDP-葡萄糖脂質載體轉移酶基因wcaJ、GDP-甘露糖甘露糖基水解酶基因nudD、6-磷酸果糖激酶-1基因pfkA、蛋白酶基因lon的菌株為宿主菌,敲除了葡萄糖特異性轉運蛋白酶EⅡABCGlc組件編碼基因并在EⅡABCGlc組件編碼基因位點整合了糖外排轉運蛋白基因SetA和葡萄糖轉運蛋白基因Glf;敲除了葡萄糖激酶基因Glk,并在Glk位點處整合了β-1,4-半乳糖基轉移酶基因;敲除了UDP-葡萄糖-6-脫氫酶基因ugd,并在ugd位點處整合了UDP-葡萄糖-4-差向異構酶基因GalE;所述EⅡABCGlc組件編碼基因為crr和ptsG; 所述葡萄糖轉運蛋白基因Glf的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述糖外排轉運蛋白基因SetA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示; 所述β-1,4-半乳糖基轉移酶為核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的NmlgtB、核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的AaGalT或核苷酸序列如SEQIDNO.5所示的PmGalT; 所述UDP-葡萄糖-4-差向異構酶基因GalE的GeneID為945354; 所述的宿主為大腸桿菌。
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