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龍圖騰網獲悉浙江工業大學申請的專利一種提高7-DHC產量的釀酒酵母基因工程菌及其構建與應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN116179384B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-08-22發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202310058515.6，技術領域涉及：C12N1/19；該發明授權一種提高7-DHC產量的釀酒酵母基因工程菌及其構建與應用是由柳志強;柯霞;潘子豪;杜宏斐;鄭裕國設計研發完成，并于2023-01-18向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種提高7-DHC產量的釀酒酵母基因工程菌及其構建與應用在說明書摘要公布了：本發明涉及一種7?DHC出胞分泌合成的釀酒酵母基因工程菌株，及其構建方法和應用。本發明構建了一株可向胞外高效轉運7?DHC的重組S.cerevisiae菌株sc13，利用其進行500mL搖瓶雙相發酵時，7?DHC總產量達到28.189mgg分泌量11.701mgg，相較于對照sc1菌株，7?DHC總產量提升14.54倍，胞外總分泌量提升13.77倍，其中胞外7?DHC的分泌產量占比41.51％。由本發明構建的重組菌株具有更強的外分泌能力和更高的產量，對7?DHC的合成以及簡化7?DHC的分離提取提供了指導思路，具有廣闊的應用前景。

本發明授權一種提高7-DHC產量的釀酒酵母基因工程菌及其構建與應用在權利要求書中公布了：1.一種構建提高7-DHC胞外分泌產量的釀酒酵母基因工程菌的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟： （1）敲除麥角固醇合成所需的C-22甾醇去飽和酶ERG5，并將PGAP-DHCR24-TCYC1片段整合到釀酒酵母CEN.PK2-1C基因組上的ERG5位點，構建得到的釀酒酵母命名為sc1菌株；其中，DHCR24序列如SEQIDNo.1所示； （2）將PGAL2-ERG1-TCYC1片段整合至sc1菌株基因組上，整合至GAL6位點，通過PGAL2啟動子強化表達ERG1，構建得到釀酒酵母命名為sc2菌株； （3）將PGAL1-tHMG1-TCYC1片段整合至sc2菌株基因組上Ty1兩端的δ序列中，通過PGAL1啟動子強化表達tHMG1，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc3菌株；所述tHMG1的GeneID為42650； （4）將TTEF-TADH1-ERG8-PGAL10-PGAL1-ERG12-TCYC1片段整合至sc3菌株基因組上的GAL80位點，通過PGAL1，10雙向啟動子強化表達ERG8和ERG12，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc4菌株； （5）將TTEF-PGAL1-POS5-TCYC1片段整合至sc4菌株基因組上的MIG1位點，通過PGAL1啟動子強化表達POS5，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc5菌株； （6）將TTEF-TADH1-ERG9-PGAL10-PGAL1-ERG20-TCYC1片段整合至sc5菌株基因組上的DPP1位點，通過PGAL1，10雙向啟動子強化表達ERG20和ERG9，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc6菌株； （7）將TTEF-PGAL1-ERG11-TCYC1片段整合至sc6菌株基因組上的GDH1位點，通過PGAL1啟動子強化表達ERG11，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc7菌株； （8）將TTEF-TADH1-IDI1-PGAL10-PGAL1-ERG19-TCYC1片段整合至sc7菌株基因組上的ADH3位點，通過PGAL1，10雙向啟動子強化表達IDI1和ERG19，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc8菌株； （9）將PGAL1-DHCR24-TCYC1片段整合至sc8菌株基因組上的Ty3位點，通過PGAL1啟動子異源表達DHCR24，構建得到釀酒酵母菌株命名為sc9菌株； （10）將表達框PGAL1-ST1、PGAL1-PR1與線性化質粒pMD20-ERG6進行連接，得到同時過表達敲除片段H1-PGAL1-ST1-PGAL1-PR1-H2，將H1-PGAL1-ST1-PGAL1-PR1-H2導入sc9菌株基因組，構建得到敲除ERG6并過表達ST1和PR1轉運蛋白的釀酒酵母菌株命名為sc13菌株，即所述提高7-DHC胞外分泌產量的釀酒酵母基因工程菌；所述ST1的Genebank序列號為XP_717917.2，所述PR1的Genebank序列號為XP_031058987.1。

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