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龍圖騰網獲悉宜昌東陽光長江藥業股份有限公司申請的專利一種高耗氧、高產熱的畢赤酵母高密度發酵工藝、放大方法和發酵裝置獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115521865B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-09-19發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202211109775.3，技術領域涉及：C12M1/38；該發明授權一種高耗氧、高產熱的畢赤酵母高密度發酵工藝、放大方法和發酵裝置是由李爽;曾進;賈永峰;戴祖冰;蘇周;鐘源設計研發完成，并于2022-09-13向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種高耗氧、高產熱的畢赤酵母高密度發酵工藝、放大方法和發酵裝置在說明書摘要公布了：本發明涉及一種高耗氧、高產熱的畢赤酵母高密度發酵工藝、放大方法和發酵裝置。所述發酵工藝包括：將活化后的菌種接種至種子培養基中；將擴培后的菌種接種至發酵起始培養基中；待溶氧值反彈時，開始補加甘油溶液，然后按梯度流加策略調整甘油補加速率；待達到一定菌濃后，停止補加甘油，并開始補加甲醇溶液進行誘導表達目標產物。本發明以嗜甲醇畢赤酵母發酵為對象，進行了工藝上的優化，并對生產規模的發酵裝置進行設計，從而實現了發酵規模的放大。

本發明授權一種高耗氧、高產熱的畢赤酵母高密度發酵工藝、放大方法和發酵裝置在權利要求書中公布了：1.一種高密度發酵工藝中的酵母高密度培養設備進行嗜甲醇畢赤酵母的高密度發酵工藝，其特征在于，培養設備為發酵罐，發酵罐規模為12000L，發酵罐包括設有排氣冷凝裝置（1）、攪拌裝置（2）、通氣裝置（3）、冷卻環形管（5）、空氣分布器（9）和罐體（6）；攪拌裝置（2）包括：位于發酵罐內的攪拌軸（7），并由罐底的攪拌電機（4）驅動，攪拌軸（7）上設有攪拌槳組（8）；所述空氣分布器（9）為環形空氣分布器；均勻分布了若干個孔；所述攪拌槳組（8）上的攪拌葉為軸向混合斜葉漿和徑向混合半圓槳交替布置；攪拌槳組（8）為四組攪拌槳，第一層和第三層槳葉為斜葉槳，第二層和第四層槳葉為半圓槳，冷卻環管位于由下至上第三層和第四層攪拌槳葉的下方，且冷卻環管兩側對稱設有支撐桿； 通氣裝置（3）為環形空氣分布器，均勻分布有431個6.3mm的出氣孔，環形分布器直徑與最下層攪拌槳葉直徑相同； 發酵罐罐體設有三層獨立的夾套，冷卻環管采用徑向環管； 夾套和徑向環管式均流通5～7℃冷凍循環水； 所述發酵罐的氧傳質能力KLa=501h-1； 所述發酵工藝包括如下步驟： （1）菌種擴培：將活化后的菌種接種至種子培養基中，于30℃振蕩培養12h后，以1.2％的體積比轉接到二級種子培養基中，于30℃振蕩培養22h； （2）發酵培養： ①起始生長階段：將擴培后的菌種接種至發酵起始培養基中，接種濃度為2.0～6.0×105cfumL，培養溫度控制在28～32℃，通氣比為1.0～1.5vvm；調整攪拌轉速控制溶氧值≥50％，培養至14h左右該階段結束； ②甘油補加階段：發酵培養0-14h期間不補加甘油，培養至14h后開始補加甘油溶液，14-15h設置速率為10Lhm3的初始速率補加甘油溶液，之后每小時提速率3Lhm3，21h停止提升甘油補加速率，維持26Lhm3直至甘油補加結束，甘油溶液的組成為：0.5gL的甘油溶液； 同時補入尿素溶液作為氮源，控制溫度為28～32℃，通氣比為1.0～1.5vvm，培養至菌體濃度OD600為150～300時停止補加甘油； ③甲醇誘導階段：停止補加甘油30～50min后，開始補加甲醇溶液進行誘導，設定不同階段的CN（甲醇與尿素溶液質量比）分別為：誘導開始~70h為10:1，70h~90h為15:1；90h~120h為30:1，120h~發酵結束為15:1；補加甲醇溶液后先降溫至28℃培養90h后，再降溫至25℃結束，通氣比為1.5～2.5vvm，培養140～180h時結束； 尿素溶液的濃度為0.45gL。

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